产品货号:
WH0163
中文名称:
T4 RNA连接酶I
英文名称:
T4 RNA Ligase 1
产品规格:
1.5kU|10kU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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T4 RNA Ligase I是ATP依赖型的单链核酸分子(RNA或DNA)连接酶。连接效率受供体和受体各自的碱基影响。DNA与RNA之间的连接效率较RNA之间的连接效率低,DNA之间的连接效率最低。本产品来源于含有T4噬菌体RNA连接酶基因表达质粒的大肠杆菌菌株。该酶分子量约为43.5kDa。本制品浓度为20U/μl。
产品特点:
·催化单链RNA分子之间的高效率连接;
·蛋白比活性高,稳定性好。
产品组成:
储存条件:-25℃~-15℃保存。
贮存液成分:10mM Tris-HCl,50mM KCl,0.1μM ATP,0.1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油。
适用范围:
1.在二代测序(NGS)应用中,主要用于miRNA文库构建中的5'端接头的连接。
2.单链RNA分子之间的连接。
单位定义:
在1×T4 RNA Ligase Buffer反应液中,37℃、30min内使0.4μg等摩尔比23nt单链RNA寡核苷酸的两条单链(其中一条5'端磷酸化修饰)连接50%时,所需要的酶量定义为1个活性单位(U)
质量控制:
使用方法:
1.在NGS文库构建过程中,一般按终浓度1U/μl的量加入T4 RNA连接酶1。也可根据实验具体情况来调整用量。
2.在其他应用中的使用例如下:
反应条件:在5~16℃下反应16~18小时;加入2 μl的0.5M EDTA终止反应。
相关搜索:T4 RNA连接酶I,T4 RNA Ligase 1
产品特点:
·催化单链RNA分子之间的高效率连接;
·蛋白比活性高,稳定性好。
产品组成:
组分 | WH0163-1 | WH0163-2 |
T4 RNA Ligase I | 1500U | 10000U |
10×T4 RNA Ligase1 Buffer | 250μl | 1.5ml |
储存条件:-25℃~-15℃保存。
贮存液成分:10mM Tris-HCl,50mM KCl,0.1μM ATP,0.1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油。
适用范围:
1.在二代测序(NGS)应用中,主要用于miRNA文库构建中的5'端接头的连接。
2.单链RNA分子之间的连接。
单位定义:
在1×T4 RNA Ligase Buffer反应液中,37℃、30min内使0.4μg等摩尔比23nt单链RNA寡核苷酸的两条单链(其中一条5'端磷酸化修饰)连接50%时,所需要的酶量定义为1个活性单位(U)
质量控制:
性质 | 描述 | |
蛋白纯度 | 蛋白纯度 | >99% |
酶活性 | 16,800U/mg | |
单链核酸外切酶 | 200 U酶中,<5.0% | |
双链核酸外切酶 | 200 U酶中,<1.0% | |
双链核酸内切酶 | 200 U酶中,未检出 | |
宿主基因组污染 | 200 U酶中,<10拷贝 | |
非特异性RNase残留 | 200 U酶中,未检出 |
使用方法:
1.在NGS文库构建过程中,一般按终浓度1U/μl的量加入T4 RNA连接酶1。也可根据实验具体情况来调整用量。
2.在其他应用中的使用例如下:
成分 | 用量 |
Single-stranded RNA or DNA | 1~2 μg |
10×T4 RNA Ligase1 Buffer | 5μl |
T4 RNA Ligase I(20U/μl) | 40~50 U |
0.1%BSA | 3 μl |
PEG6000 | 25% |
ddH2O | 至50 μl |
反应条件:在5~16℃下反应16~18小时;加入2 μl的0.5M EDTA终止反应。
相关搜索:T4 RNA连接酶I,T4 RNA Ligase 1