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本制品是由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。由于T4 DNA聚合酶同时具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’ DNA外切酶活性，可以用于将5’端突出末端补平或3’端突出末端削平，也可用于通过置换反应进行标记DNA探针合成、通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点、定点突变过程中第二链的合成以及不依赖于连接反应的PCR产物克隆等。本T4 DNA聚合酶的3’→5’ DNA外切酶活性比Klenow Fragment要高约100-1,000倍，且对于单链DNA要比双链DNA活性更高。本酶不含5’→3’DNA的外切核酸酶活性，于70℃加热10分钟可使其失活，金属离子螯合剂可以抑制其活性。

• 本酶的最适pH为8～9，在pH7.5及pH9.7时活性约为50%。
  
• 活性的表达需要Mg²⁺的存在。为了获得最大活性，还需要SH基的还原剂存在。
  
• 整个反应体系中的离子强度超过100mM时活性将被抑制。
  
• 本酶易受模板DNA高级结构的影响，T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶的活性，而3’→5’的外切核酸酶活性则完全被抑制。

• DNA 5’或3’突出末端平滑化：
  
  • 参考如下表格设置反应体系
    

    成分	用量
    digested DNA	>0.1pmol
    10×T4 DNA Polymerase Reaction Buffer	2μL
    dNTP Mixture (2.5mM each)	0.8μL
    T4 DNA Polymerase (3U/μl)	0.2μL
    ddH2O	至20μL

  • 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀后离心沉淀液体。
    
  • 置于11℃反应20分钟，或室温（20～25℃）反应5分钟。
    
  • 70℃保温10分钟终止反应。
• 其他用途请自行参考T4 DNA Polymerase的相关文献资料进行。