产品货号：
WE0237
中文名称：
T4多聚核苷酸激酶
英文名称：
T4 Polynucleotide Kinase
产品规格：
500U|2500U
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
T4多聚核苷酸激酶是由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体，可以催化磷酸在ATP的γ-位和寡核苷酸链（双链或单链DNA或RNA）的5’-羟基末端以及3’-单磷酸核苷间进行转移和交换，同时还具有3’磷酸酶活性，能将3’-磷酸基团从寡核苷酸的3’磷酸末端、脱氧3’-单磷酸核苷和脱氧3’-二磷酸核苷上水解掉。该T4多聚核苷酸激酶可用于寡核苷酸、DNA或RNA的5’末端标记或磷酸化；催化3’磷酸化的单核苷酸5’磷酸化以及去除3’端磷酸基团等。本制品于75℃加热10分钟可使其失活，加入EDTA也可使其失活，金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50mM的KCl和NaCl均可显著抑制其活性。
| 组分 | 500U | 2500U |
| T4 Polynucleotide Kinase (10U/μl) | 50μL | 250μL |
| 10×T4 PNK Reaction Buffer | 150μL | 800μL |
保存：-20℃
1个活性单位是指在37℃条件下，30分钟内，将转移ATP上1nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5'-OH末端所需的酶量。
经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；经检测无核酸内、外切酶、磷酸酶和RNA酶活性的污染。
- 由于铵盐可强烈抑制T4 Polynucleotide Kinase的活性，因此铵盐沉淀所得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的标记反应。
- PEG可促进磷酸化反应速率和效率，交换反应体系应加入PEG。
- 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
一、DNA 5’末端磷酸化
- 参考如下表格设置反应体系(20μL)
成分 用量 待磷酸化DNA 1-20pmol（5'末端） 10×T4 PNK Reaction Buffer 2μL 0.1mM ATP 1μL T4 Polynucleotide Kinase (10U/μL) 1μL ddH2O 至20μL - 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀后离心沉淀液体。
- 置于37℃孵育30分钟。
- 加入1μL 0.5M/pH8.0的EDTA以终止反应。
二、DNA 5’末端标记
- 参考如下表格设置反应体系(20μL)
成分 用量 待磷酸化DNA 1-20pmol（5'末端） 10×T4 PNK Reaction Buffer 2μL [γ-32P or γ-33P]-ATP (3000 Ci/mmol) 20pmol T4 Polynucleotide Kinase (10U/μL) 1μL ddH2O 至20μL - 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀后离心沉淀液体。
- 置于37℃孵育30分钟。
- 加入1μL 0.5M/pH8.0的EDTA以终止反应。
三、其他用途请自行参考相关文献资料进行
相关搜索：T4多聚核苷酸激酶，T4 PNK，T4多聚核苷酸激酶，T4 Polynucleotide Kinase