产品目录

DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg²⁺或Mn2+都可以激活DNase I的活性，而Ca²⁺浓度直接影响酶的活性。Mg²⁺存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口；而在Mn2+存在下可使双链DNA断裂，使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备，逆转录及体外转录等实验。

• 因为DNase I经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验，所以在酶制备过程中最大限度的避免了RNase污染，可以安全地用于RNA的提取，但由于该酶中不含RNase抑制剂，提醒使用时注意防止外源RNase的污染。
  
• DNase I受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。
  
• 每处理1μg RNA，DNase I用量不要超过1U。

• 以制备用于RT-PCR的RNA样品为例，配置10μL反应体系，如下表：
  

  成分	用量	终浓度
  RNA	XμL	1μg
  10×Reaction Buffer	1μL	1×
  RNase-Free DNase I	1μL	1U
  RNase-Free Water	YμL	至10μL

• 37℃孵育30分钟。
  
• 加入1μL 200mM EDTA，65℃孵育10分钟，使DNase I失活，终止反应。
  
• 处理后的RNA可用于RT-PCR。