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SUMO蛋白酶识别完整的SUMO标签蛋白，并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比，由于其识别序列长，所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性，且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力，例如温度(4～30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签，便于使用亲和层析的方法，去除SUMO蛋白酶，纯化目的蛋白。

来源：大肠杆菌表达
标签：多聚His标签
纯度：＞90%(SDS-PAGE和HPLC)
分子量：26.55kDa


30℃，SUMO Protease 1小时酶切5μg含有酶切位点的融合蛋白，酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位，即1U。

组分	100U	500U	1000U
SUMO蛋白酶(1U/μL)	100μL	500μL	1mL
10×SUMO Buffer(salt-)	200μL	1mL	2mL
10×SUMO Buffer(salt+)	200μL	1mL	2mL

保存：-80℃，避免反复冻融，有效期1年。


25mM Tris-HCl(pH8.0)，0.1% Igepal (NP-40)，250mM NaCl，500μM DTT，50%甘油。


该酶酶活定义使用10×SUMO Buffer(salt^-)。SUMO Protease在10×SUMO Buffer(salt^-)中活性相对较高，但对于不稳定的底物应选择10×SUMO Buffer(salt⁺)，我们也提供了+salt的反应缓冲液，请根据您的实验选择正确的缓冲液。

• 10×SUMO Buffer(salt^-)：500mM Tris-HCl(pH8.0)，2% Igepal (NP-40)，10mM DTT。
  
• 10×SUMO Buffer(salt^-)：500mM Tris-HCl(pH8.0)，2% Igepal (NP-40)，10mM DTT，1.5M NaCl。

• 在EP管中配制如下反应体系
  

  成分	用量
  融合蛋白	50μg
  10×SUMO Buffer	20μL
  ddH2O	至190μL
  SUMO Protease(1U/μL)	10μL

  
  
• 30℃孵育，在1、2、4和6小时分别吸出20μL上述反应液，置于单独的EP管中。
  
• 向上述EP管中加入20μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
  
• 样品全部反应完毕后，样品煮沸5min，取30μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
  注：如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，延长反应时间，并增加SUMO酶用量，以保证酶切效果。
  表1．不同温度下SUMO蛋白酶切活性
  

  反应时间(h)	不同温度下剪切活性(%)
  	4℃	16℃	25℃	30℃
  0.5	48	73	83	88
  1	60	87	90	93
  2	71	94	94	95
  3	74	95	95	95

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