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E.coli核酸内切酶III（Nth）既有N-糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶（AP）位点。AP-裂解酶活性则切割AP位点的3′端，产生一个5′磷酸和一个3′磷酸-α,β不饱和醛。

被核酸内切酶III识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。




用途：

• 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
  
• 碱性析出
  
• 碱解旋

产品组成：

组分	规格
Endonuclease III (Nth)，10 units/μL	100μL
10×EndoIII Buffer	1mL

来源：
克隆有nth基因的重组E.coli菌株。

单位定义：
1单位指在10μL反应体系中，37℃条件下，1小时能切割1pmol含一个AP位点*的34 bp寡核苷酸双链所需要的酶量。
* AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）处理10pmol含一个尿嘧啶碱基的34 bp寡核苷酸双链2分钟。

反应条件：
1×EndoIII Buffer，37℃温育。

1×EndoIII Buffer：
20mM Tris-HCl，1mM EDTA，1mM DTT，pH8.0@25℃

酶储存液：
10mM Tris-HCl，250mM NaCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，200μg/ml BSA，50% Glycerol，pH7.4

热失活：65℃加热20分钟。

彗星试验的推荐稀释倍数：1:10⁴～10⁵。
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