产品货号:
SV0513
中文名称:
NarI限制性内切酶
英文名称:
NarI Restriction Endonuclease
产品规格:
250U|500U|2500U
发货周期:
已停产
产品价格:
已停产
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5'…G G▼C G C C…3'
3'…C C G C▲G G…5'
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NarI由携带NarI基因的E.coli表达而来,该基因来自Norcardia argentinensis(ATCC 31306)。
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一个单位是指50μL反应体系中,37℃下1小时内消化1μg λDNA(HindIII)所需的酶量。
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组分 | 250U | 500U | 2500U |
NarI(5U/μL) | 50μL | 100μL | 500μL |
10×CutFast Buffer | 1.25mL | 1.25mL | 1.25mL |
保存:-20℃
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10mM Tris-HCl,50mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,200μg/mL BSA,50% Glycerol,pH7.4@25℃。
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1×CutFast Buffer,37℃反应5~15分钟。
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65℃加热20分钟。
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1×CutFast Buffer:
50mM乙酸钾,20mM Tris-乙酸,10mM乙酸镁,100μg/mL重组白蛋白,pH7.9@25℃。
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NarI限制性内切酶在不同酶切缓冲液中的活力表现如下:
缓冲液 | 活性 |
BalbBuffer 1.1 | 100% |
BalbBuffer 2.1 | 100% |
BalbBuffer 3.1 | 10% |
CutFast Buffer | 100% |
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内切酶稀释液A
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- NarI是KasI的同裂酶。NarI产生一个2碱基5'突出末端,而KasI产生一个4碱基5'突出末端。
- 表现出标记位点偏好性,在pBR322上548bp位置的NarI位点处,酶切十分缓慢。
- 在标准的限制性酶切条件下,NarI需要两个位点进行高效酶切。但是,如使用过量的酶,则可能实现单个位点的酶切。对于包含单个NarI位点的底物,建议对每1μg的DNA底物使用20个单位的酶。或者,可以使用异裂酶SfoI。SfoI没有像NarI那样表现出强烈的位点偏好。
- 该酶在切割某些超螺旋质粒时活性较低,酶切1μg质粒DNA需要超过1个单位的酶量。如需完全酶切1μg质粒DNA,请采用我们推荐的酶切方案。
- 因为反应中酶的稳定性,即使温育时间超过1小时也不会提高酶切效率,除非增加酶量。
- NarI对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感,对dam、dcm甲基化不敏感。
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