产品货号:
MT0090
中文名称:
DNase I
英文名称:
RNase-Free DNase I
产品规格:
1000U|10KU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本产品是将单链或双链DNA同等程度的随机分解,生成具有5'-P末端寡核苷酸的脱氧核糖核酸内切酶。由于RNase-free DNase I中Protease已几乎被完全去除,从而提高了该酶在pH中性区域的稳定性。此外RNase-Free DNase I中添加了RNase Inhibitor,用于抑制RNA样品中残留的RNase核酸酶,因此可以有效抑制RNA提取过程中RNase酶对RNA的降解。Stop Buffer终止反应后,可通过一步加热失活DNase I活性。本产品常用于去除RNA样品中的DNA污染。
以小牛胸腺DNA为底物,在25℃、pH5.0的条件下,1分钟内使反应液的260nm吸光度增加0.001所需要的酶量定义为1个活性单位。
保存:-20℃,有效期2年。
10U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
一、去除RNA中的基因组DNA污染
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以小牛胸腺DNA为底物,在25℃、pH5.0的条件下,1分钟内使反应液的260nm吸光度增加0.001所需要的酶量定义为1个活性单位。
组分 | 1000U |
RNase-Free DNase I(10U/μL) | 100μL |
10×RD Buffer | 500μL |
10×RD Stop Buffer | 500μL |
保存:-20℃,有效期2年。
10U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
- 通常加热方法即可失活DNase I。如需要去除残留的变性蛋白,可在37℃消化完毕后使用酚氯仿抽提并沉淀RNA样品(不进行加热操作)。
- 10×RD Stop Buffer中含有螯合剂用于去除二价阳离子,进行加热失活前,必须加入5μL 10×RD Stop Buffer并混合均匀,再进行热失活,否则会导致RNA降解。
- 处理完毕的RNA样品进行一步反转录反应时,添加量需要<20%(如20μL的反转录体系中加入量要<4μL)。
一、去除RNA中的基因组DNA污染
- 按以下组分配制反应体系
成分 用量 RNA 10~50μg 10×RD Buffer 5μL RNase-Free DNase I(10U/μL) 1μL* RNase-Free H2O 至50μL
注:若RNA样品中含有超过5μg基因组DNA污染,请使用2μL该酶。 - 37℃孵育10min以消化去除基因组DNA。
- 孵育完毕后加入5μL 10×RD Stop Buffer,混合均匀室温放置1min,并置于75℃加热10min失活DNase I。样品可直接用于下一步反转录等试验。
货号 | 酶 | 消化活性 | 底物 | 产物 | 用途 |
MT0068 | Benzonase核酸酶 | 核酸内切酶活性 | 任何形式的DNA/RNA | 3~5bp寡核苷酸 | 消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。 |
MT0084 | T5核酸外切酶 | 5'-3'核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | dNMP至6寡核聚体 | DNA消化和Gibson组装 |
MT0085 | T7核酸外切酶 | 5'-3'核酸外切酶活性 | 双链DNA | ssDNA和二核苷酸 | 消化双链DNA |
MT0086 | λ核酸外切酶 | 5'-3'核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | ssDNA和dNMP | 消化双链DNA |
MT0087 | 核酸外切酶I | 3'-5'单链外切酶活性 | 单链DNA | dNMP、二核苷 | PCR扩增后降解消化引物 |
MT0088 | 热敏双链DNA核酸酶) | 双链DNA核酸酶活性 | 双链DNA | 2~8bp寡核苷酸 | 去除RNA样品中的DNA污染。 |
MT0089 | Rnase H | 核糖核酸内切酶活性 | 杂交到DNA链上的RNA | ssDNA和2~8bp的 5'磷酸寡核苷酸 | 除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。 |
MT0090 | Dnase I | 核酸内切酶活性 | 单链和双链DNA | 2~3bp寡核苷酸 | 蛋白样品中DNA的去除 |
MT0091 | Rnase A | 核酸内切酶活性 | 单链RNA | 3'-核苷磷酸 | 质粒或基因组中RNA污染的去除 |
MT0092 | DNA损伤修复酶 | 核酸外切酶活性 | DNA | DNA修复 |
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