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本制品催化dNTP聚合于单链或双链DNA的3'-OH末端的反应，该反应不需要模板，但引物必须是至少有3个以上碱基的寡核苷酸。本制品的用途包括通过Okayama-Berg法给载体或cDNA加上互补同聚尾，以及使用dNTP、ddNTP来标记DNA的3'末端。

组分	规格
TDT酶(14U/μL)	21.5μL
5×TDT酶反应缓冲液	1mL
0.1% BSA	1mL

保存：-20℃，有效期1年。


60mM K3PO4，150mM KCl，1mM DTT，50%甘油，pH7.2。


5×TDT酶反应缓冲液：
500mM HEPES(pH7.2)，40mM MgCl₂，0.5mM DTT。

• 该缓冲液含有在DNA 3'末端添加dNTP实验的主要成分。

以DNase处理后的热变性小牛胸腺DNA为起始物，37℃，pH7.2的条件下，1小时内使1nmol的[³H]dTTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量定义为1个活性单位(unit)。
活性检测条件：
100mM二甲胂酸钠，pH7.2，8mM MgCl₂，0.1mM DTT，0.024%牛血清白蛋白，160μg/mL活化的小牛胸腺DNA，0.5mM [³H] dTTP。


DNA，NaCl，EDTA，灭菌水，苯酚/氯仿/异戊醇，无水乙醇

• 按下表设置反应体系：
  

  成分	用量
  自备的DNA	4～5pmol(3'-termini)
  5×TDT酶反应缓冲液	10μL
  0.1% BSA	5μL
  自备的dGTP	0.05～0.5mM(终浓度)
  TDT酶(14U/μL)	10～15U
  自备的灭菌水	至50μL

• 37℃反应30分钟。
  
• 加入5μL自备的5M NaCl和1μL的0.5M EDTA（pH8.0）。
  
• 加入50μL自备的（等量）的苯酚/氯仿/异戊醇（25∶24∶1），充分混匀，再用冷的自备无水乙醇沉淀DNA。

• 影响反应的因素有：添加的碱基种类(dATP，dTTP，dCTP，dGTP)，缓冲液中的二价阳离子(Mg²⁺，Mn²⁺，Co²⁺)，DNA末端结构(3'-OH突出末端，平末端，3'-OH凹陷末端)。因此，每个反应都需要摸索最适条件。

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