产品货号：
JN5088
中文名称：
热敏型UDG酶
英文名称：
Heat-labile Uracil DNA Glycosylase
产品规格：
100U|500U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品来源于嗜冷海洋细菌，是经E.coil重组表达获得的热敏性尿嘧啶DNA糖基化酶。该酶可降解含尿嘧啶的单链和双链DNA，释放游离尿嘧啶，对RNA无作用。Heat-labile UDG与常规UDG酶相比，可在较低温度（20℃）下起作用，且对高温敏感，50℃反应10min就可使酶发生不可逆失活，避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含尿嘧啶扩增产物的降解作用。主要用于PCR/RT-PCR反应体系，以防止产物引起的气溶胶污染。
- 去除PCR残存污染；
- 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基，5～10min降解含dU的DNA模板；
- 适用于30℃反应，50℃灭活，尤其适合反转录一步法防污染扩增。
| 组分 | 100U | 500U |
| 热敏型UDG酶(1U/μL) | 100μL | 500μL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
20mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，100mM NaCl，1mM DTT，50% Glycerol，0.5% NP-40，0.5% Tween-20，pH8.0@25℃。
所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留以及RNase残留等。
- Heat-labile UDG可在20～37℃均有很好的活性，50℃放置5～10min或95℃放置2min可使酶发生不可逆失活；
- 1U的Heat-labile UDG在30min内可消化1μg dU-DNA；
- 50μL反应体系合适的酶用量在0.2～1μL范围内；反应时间在2～10min范围内；
- Heat-labile UDG在多种常用的PCR缓冲液中都表现很高的活性，可用于PCR/RT-PCR防污染反应；
- 该酶对RNA以及不含尿嘧啶的DNA不具有活性；
- 由于该酶没有金属离子的要求，在EDTA存在下依然具有活性。
- 一般PCR反应体系
成分 用量 10×PCR Buffer with Mg2+ 5μL 上游引物 0.2～1.0μM (终浓度) 下游引物 0.2～1.0μM (终浓度) dATP/dGTP/dCTP 0.2mM (终浓度) dUTP 0.2～0.4mM (终浓度) Taq DNA Polymerase 1.25U Heat-labile UDG(1U/μL) 0.2～1μL 模板 ＜1μg ddH2O 至50μL - 一般PCR反应程序
反应阶段 循环数 温度 时间 污染消化 1 25℃ 10min 预变性 1 95℃ 2min 变性 30～35 94℃ 20s 退火/延伸 50～60℃ 1kb/60s 终延伸 1 72℃ 5min 保温 1 4℃ -
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