产品货号：
JN5048
中文名称：
热启动Tth聚合酶(无甘油)
英文名称：
HotStart Tth DNA Polymerase(Glycerol-Free)
产品规格：
250U|2500U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是经过抗体修饰的Tth DNA聚合酶，高温加热前，抗体抑制聚合酶的活性，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。可广泛应用于各种特异性PCR反应，与Taq酶相比对血源性抑制物等抑制成分更加耐受。在Mn2+存在下，表现更强的反转录活性，可以用来进行单管一步法RT-PCR反应。本制品不包含甘油等影响冻干工艺的成分，可用于冻干反应体系的配制和产品设计。
- 同时具有反转录酶活性与聚合酶活性，能够用于一步法检测；
- 具有更高的反转录温度60℃～70℃，反转录的特异性高；
- 对PCR抑制物具有更高的耐受性。
| 组分 | 250U | 2500U |
| 热启动Tth聚合酶(无甘油，5U/μL) | 50μL | 500μL |
| 10×PCR buffer | 500μL | 5mL |
| 5×RT-PCR buffer (Mn2+ Free) | 1mL | 10mL |
| MnCl2 (25mM) | 300μL | 1mL×3 |
保存：-20℃
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
- 10×PCR buffer、5×RT-PCR buffer、MnCl2不可用于冻干。
- 热启动Tth DNA聚合酶的反转录温度在60～70℃，反转录时间可以为15～30min；
- 该体系更适合于特异性引物进行RT反应，并且引物Tm值应为60℃或更高温度。
- 反应体系中含有Mn2+，因此，本体系保真度有所降低，不适合于保真度要求较高的克隆、测序等实验。
- 使用时请上下颠倒轻轻混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的（无污染的）枪头、Microtube等，尽量避免污染。
- PCR反应
- 常用反应体系
成分 用量 10×PCR buffer 2μL 热启动Tth聚合酶(无甘油，5U/μL) 1μL dNTPs(10mM) 0.5μL 上游引物 0.2～1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2～1.0μM(终浓度) 模板 5～500ng RNase-Free Water 至20μL - 推荐PCR反应程序
循环数 温度 时间 1 94℃ 3min 35～40 94℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 45s 1 72℃ 7min
- 常用反应体系
- RT-PCR反应
- 常用反应体系
成分 用量 5×RT-PCR buffer 4μL 热启动Tth聚合酶(无甘油，5U/μL) 1μL MnCl2(25mM) 1μL dNTPs(10mM) 0.5μL 上游引物 0.2～1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2～1.0μM(终浓度) 模板 5～500ng RNase-Free Water 至20μL - 推荐反应程序
循环数 温度 时间 1 90℃ 30s 1 60℃ 25min 1 94℃ 3min 35～40 94℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 45s 1 72℃ 7min
- 常用反应体系
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