产品货号:
JN5045
中文名称:
热敏双链DNA特异性核酸酶
英文名称:
HeatLabile Double-Strand Specific DNase
产品规格:
100U|1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一种核酸内切酶,可切割DNA中的磷酸二酯键,生成具有5'-磷酸和3'-羟基末端的寡核苷酸。HL-dsDNase具有很高的比活度,且容易热失活。样品在镁离子存在的情况下,特异性地识别降解dsDNA,对dsDNA的活性至少比对ssDNA的活性高5000倍,而ssDNA和RNA基本保持完整。55℃反应5min可使该酶发生不可逆失活,又能保持RNA和ssDNA的稳定性。同时,该酶与M-MLV和AMV的反应Buffer都是兼容的,因此可应用于反转录反应中,以去除基因组DNA的污染,提高反转录效率。
- 制备不含dsDNA的RNA或ssDNA样品;
- RNA样品中去除基因组DNA污染;
- 体外转录RNA后去除模板DNA。
- 双链DNA特异性核酸内切酶;
- 在20~47℃温度范围内具有较强活性;
- 可热失活;
- 保护RNA或蛋白质的低温活性,且不影响RNA或ssDNA质量。
一个单位是指以大分子量的dsDNA为底物,在25℃和pH5.0的条件下,260nm的吸光度处每分钟增加0.001OD所需的酶量。
组分 | 100U | 1000U |
HL-dsDNase(2U/μL) | 50μL | 500μL |
10×HL-dsDNase Buffer | 1mL | 1mL×2 |
20×Stop Solution | 100μL | 1mL |
保存:-20℃
20mM Tris-HCl,10mM NaCl,50% Glycerol,2mM MgCl2,0.01% Triton-X100,pH7.5@25℃。
纯度检测:所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留。
- 该酶有很高的反应活性,可根据底物量适当降低酶添加量;
- 反应Buffer与M-MLV和AMV的反应Buffer兼容;
- 金属螯合剂、过渡金属、SDS或还原剂均可抑制该酶活性;
- 推荐20μL反转录体系中该酶的用量0.1~2U。
- 按以下组分配制反应体系
成分 用量 10×HL-dsDNase Buffer 2μL 底物 X μL HL-dsDNase(2U/μL) 0.1~2U Nuclease-Free Water 至20μL - 充分混匀,37℃反应10~30min。
加入1μL的20×Stop Solution,55℃孵育5min终止反应。
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