产品货号：
JN3057
中文名称：
痘苗病毒拓扑异构酶I
英文名称：
Vaccinia virus Topoisomerase I
产品规格：
500U|2500U
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品应用：
DNA-载体连接；缺刻修复；接头连接。
活性定义：
1单位（约1f mol）指在37℃条件下，1h内使1μg超螺旋pUC19 DNA解旋所需要的酶量。
产品组成：
保存：-20℃
保存溶液：
10mM Tris，50mM KCl，35mM (NH4)2SO4，1mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol，pH7.5@25℃。
质量控制：
使用建议：
相关搜索：痘苗病毒拓扑异构酶I，拓扑异构酶，Vaccinia，牛痘病毒，Vaccinia virus Topoisomerase I
该Topoisomerase I来源于牛痘病毒（vaccinia virus），通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构。另外，该酶可以识别且切割双链DNA末端[5'-C(T)CCTT↓-3']，并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的5'-OH基团后，重新连接形成完整DNA链。因此，使用该酶可作为DNA连接的有效工具，可用于DNA的载体连接、缺刻修复、接头连接等实验。
产品应用：
DNA-载体连接；缺刻修复；接头连接。
活性定义：
1单位（约1f mol）指在37℃条件下，1h内使1μg超螺旋pUC19 DNA解旋所需要的酶量。
产品组成：
| 组分 | 500U | 2500U |
| Topoisomerase I(20U/μL) | 25μL | 25μL×5 |
| 10×TOPOI Buffer | 1mL | 1mL×5 |
保存：-20℃
保存溶液：
10mM Tris，50mM KCl，35mM (NH4)2SO4，1mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol，pH7.5@25℃。
质量控制：
- 经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，纯度达95%；
- 内毒素含量<100EU/mg；
- qPCR方法检测无大肠杆菌基因组残留；
- 无RNase、核酸内、外切酶污染。
使用建议：
- 该酶的最佳反应温度为37℃，反应时间10～30min。80℃反应20min可使该酶失活。
- 该酶切割偶联试验时，识别位点[5'C(T)CCTT↓]的3'端碱基数量影响偶联效率。
- 共价复合物进行DNA分子连接时，底物5’-端需要保留-OH基团。
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