产品货号：
JN3004
中文名称：
Cas9 H840A切刻酶
英文名称：
Cas9 H840A Nickase
产品规格：
50μg
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是spCas9 Nuclease的一个突变体。Cas9 Nuclease具有两个切割活性中心，从而实现在sgRNA靶序列特定位点引入DNA双链断裂（DSB）。Cas9 H840A Nickase在Cas9 Nuclease基础上突变其中一个切割活性中心，其能在sgRNA靶序列所在的DNA链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂。Cas9 H840A Nickase配合一对gRNA使用，可实现Cas9 Nuclease相同的基因编辑效果，由于有效的识别序列由20bp增加至40bp，可明显减少意外的脱靶基因修饰，从而显著提高CRISPR/Cas9技术基因修饰的特异性。
- 纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰；
- 可显著降低脱靶效应。
- 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
- 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
- sgRNA剪切靶点DNA效率检测，降低体内筛选成本；
- 体外剪切靶DNA的特异位点。
Cas9 H840A Nickase DNA切割活性检测，50～100ng酶可有效切割cccDNA（>95%）。
cccDNA：带有靶位点的超螺旋DNA；
ocDNA：酶切产生切刻后的开环DNA。
| 组分 | 规格 |
| Cas9(H840A) Nickase(0.1μg/μL) | 500μL |
| 10×Reaction Buffer | 1mL |
保存：-20℃
10mM Tris-HCl，300mM NaCl，0.1mM EDTA，50% Glycerol，PH7.4，25℃。
- 经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，纯度达95%；
- 内毒素含量<0.1EU/μg；
- qPCR方法检测无大肠杆菌基因组残留；
- 无RNase、核酸内、外切酶污染。
- 按下表加入各成分配置反应体系(20μL)：
成分 用量 Supercoiled DNA 200ng sgRNA 200ng Cas9（H840A）Nickase 50～100ng 10×Reaction Buffer 2μL RNase-Free Water 至20μL
注：在反应体系中可添加RNase Inhibitor至1U/μL，防止RNase污染 - 37℃反应1小时。
- 70℃加热10分钟。
| 货号 | 名称 | 说明 |
| JN0065 | NLS-Cas9 Nuclease | |
| JN3003 | Cas9 D10A Nickase | 能在与sgRNA靶序列互补的DNA链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减少意外的脱靶基因修饰。 |
| JN3004 | Cas9 H840A Nickase | 能在与sgRNA靶序列非互补的DNA链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，可以减少意外的脱靶基因修饰。 |
| JN3005 | Cas9(D10A,H840A)Nuclease | 为Cas9 D10A和H840A双突变失活酶，具有靶DNA结合活性，但无切割活性，可用于阴性对照等用途。 |
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