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本制品是将TopA基因（E.coli）在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。完整的DNA拓扑异构酶I（DNA Topoisomerase I）全酶是一分子量97kDa的蛋白。

DNA拓扑异构酶I催化4种反应：

• 催化负超螺旋DNA的松弛。
  
• 在单链环状DNA分子内形成绳结(Knotting)和解开绳结(Unknotting)。
  
• 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
  
• 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时，发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。

• 催化负超螺旋松弛；
  
• 识别错配；
  
• DNA的结构转换和解析。

25μL反应体系，在37℃条件下反应15分钟，能催化＞95%的0.5μg pUC19 RF I型（负超螺旋）DNA的解旋所需要的酶量定义为一个单位。DNA超螺旋化通过不含EB的琼脂糖凝胶电泳来检测。

组分	50U	250U
DNA Topoisomerase I (5U/μL)	10μL	5×10μL
10×TopoI Reaction Buffer	1mL	5×1mL

保存：-20℃


1×DNA TopoI Reaction Buffer：
50mM KAc，20mM Tris-Ac，10mM MgAc2，100μg/mL BSA(pH7.9@25℃)。


1×TopoI Reaction Buffer，37℃温育。


65℃加热20分钟。


经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。


pUC19 RF I型DNA用DNA拓扑异构酶I处理后进行琼脂糖凝胶电泳时，如果胶中含有EB染料，反应前后DNA条带位置不发生改变。这是由经过DNA拓扑异构酶I的作用转换为松弛型的DNA受EB影响，再次变为超螺旋状态造成的。因此使用DNA拓扑异构酶I作用后，先用不含EB染料的胶先进行电泳，再用EB染色。
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