产品货号：
JN0078
中文名称：
Cre重组酶
英文名称：
Cre Recombinase
产品规格：
25U|5×25U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是把编码细菌噬菌体P1 Cre蛋白的质粒在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的Cre重组酶。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶，催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。loxP识别元件是一34bp序列，其两端是两个13bp的反向重复序列，中间是起定向作用的8bp间隔区。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向而不同，两个含单loxP位点的DNA将被融合。两个正向重复loxP位点间的DNA将以环状形式切割，而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。
保存：-20℃
在50μL反应体系中，37℃ 30分钟条件下，使0.25μg的pLox2+对照DNA产生最大位点特异性重组所需要的酶量定义为一个单位。最大重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行氨苄抗性平板筛选。
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
1×Cre反应缓冲液，37℃温育。
70℃加热10分钟。
1×Cre反应缓冲液：
33mM NaCl,10mM MgCl2,50mM Tris-HCl（pH7.5@25℃）
相关搜索：Cre重组酶，噬菌体P1 Cre蛋白，Cre Recombinase
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶，催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。loxP识别元件是一34bp序列，其两端是两个13bp的反向重复序列，中间是起定向作用的8bp间隔区。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向而不同，两个含单loxP位点的DNA将被融合。两个正向重复loxP位点间的DNA将以环状形式切割，而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。
- 两个loxP位点之间DNA的切割；
- 含loxP位点DNA分子的融合；
- loxP位点之间DNA序列的翻转。
| 组分 | 25U | 5×25U |
| Cre重组酶(1U/μL) | 25μL | 5×25μL |
| 10×Cre反应缓冲液 | 1mL | 5×1mL |
保存：-20℃
在50μL反应体系中，37℃ 30分钟条件下，使0.25μg的pLox2+对照DNA产生最大位点特异性重组所需要的酶量定义为一个单位。最大重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行氨苄抗性平板筛选。
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
- 进行琼脂糖凝胶电泳前，将Cre重组酶反应混合物于70℃温育10分钟。
- 延长温育时间不会提高重组效率，反而可能会导致大分子量重组产物的生成。
- 反应中增加Cre重组酶量，将会形成loxP依赖性Cre-DNA复合物，从而抑制重组反应。
1×Cre反应缓冲液，37℃温育。
70℃加热10分钟。
1×Cre反应缓冲液：
33mM NaCl,10mM MgCl2,50mM Tris-HCl（pH7.5@25℃）
相关搜索：Cre重组酶，噬菌体P1 Cre蛋白，Cre Recombinase