产品货号:
JN0065
中文名称:
Cas9核酸酶
英文名称:
NLS-Cas9 Nuclease
产品规格:
50μg|500μg
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品提供的Cas9核酸内切酶通过在蛋白两端加了核定位信号(NLS),可使蛋白进入细胞核内进行基因组编辑。本制品为纯蛋白体系,避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR序列中,并利用相应的CRISPR RNAs (crRNAs)来指导Cas9蛋白对同源序列的降解,从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,可用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。
- 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除;
- 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入;
- sgRNA剪切靶点DNA效率检测,降低体内筛选成本;
- 体外剪切靶DNA的特异位点。
Cas9蛋白做DNA片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段为6100bp;
酶切后的片段为3900bp和2200bp。
组分 | 50μg | 500μg |
NLS-Cas9 Nuclease(1μg/μL) | 50μL | 500μL |
10×Reaction Buffer | 500μL | 5×1mL |
保存:20℃
- 按下表加入各成分配制体外切割体系(20μL):
成分 用量 dsDNA 200ng sgRNA 200ng NLS-Cas9 Nuclease 0.5~1μg 10×Reaction Buffer 2μL RNase-Free H2O 至20μL
注:可在反应体系中添加20U的RNase抑制剂,防止dsDNA不纯导致sgRNA的降解。 - 37℃保温1小时。
- 70℃保温10分钟。
货号 | 名称 | 说明 |
JN0065 | NLS-Cas9 Nuclease | |
JN3003 | Cas9 D10A Nickase | 能在与sgRNA靶序列互补的DNA链上产生切口,从而形成功能性的单链断裂,可以减少意外的脱靶基因修饰。 |
JN3004 | Cas9 H840A Nickase | 能在与sgRNA靶序列非互补的DNA链上产生切口,从而形成功能性的单链断裂,可以减少意外的脱靶基因修饰。 |
JN3005 | Cas9(D10A,H840A)Nuclease | 为Cas9 D10A和H840A双突变失活酶,具有靶DNA结合活性,但无切割活性,可用于阴性对照等用途。 |
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