产品货号：
GS5311
中文名称：
Platinum聚合酶
英文名称：
Platinum Taq DNA Polymerase
产品规格：
1kU|5kU
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
活性定义：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
使用方法：
相关搜索：Platinum聚合酶，Taq酶，Platinum Taq DNA Polymerase
Platium Taq DNA Polymerase简称Taq酶，是最常用的DNA聚合酶之一。Platium Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶，分子量是94kDa。是将Thermus aquaticus DNA Polymerase的基因重组表达后，分离提取而得到的。使用本制品扩增得到的PCR产物的3'端附有“A”碱基，因此可直接克隆于T-Vector中。
活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶 物的活性定义为1个活性单位(U)。
产品组成：
| 组分 | 1kU | 5kU |
| Platium Taq DNA Polymerase(5U/μL) | 200μL | 1mL |
| 5×Platium Taq Buffer(含镁) | 4mL | 4mL×5 |
保存：-20℃，有效期1年。
使用方法：
- PCR反应体系的设置：
- 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应PCR液体分装使用，避免反复冻融。
- 参考下表设置的反应，建议PCR反应体系的配置在冰浴或在冰盒上进行：
成分 用量 5×Platium Taq Buffer(含镁) 10μL dNTPs(各2.5mM) 4μL 模板DNA X μL 正向引物(20μM) 1μL 反向引物(20μM) 1μL Platium Taq DNA Polymerase(5U/μL) 0.5～1μL 双蒸水或Milli-Q水 至50μL 对于不同类型的模板在50μL反应体积中推荐用量如下：- 哺乳动物基因组DNA：0.1～1μg；
- 大肠杆菌基因组DNA：10～100ng；
- 质粒DNA：0.1～10ng。
- 哺乳动物基因组DNA：0.1～1μg；
- 用移液器轻轻吹打混匀或轻微Vortex混匀，室温离心数秒，使液体积聚于管底。
- 各设置好的PCR反应管置于PCR仪上，开始PCR反应。
- 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应PCR液体分装使用，避免反复冻融。
- PCR反应参数的设置以扩增1kb目的片段为例：
步骤 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 3min 1 变性 95℃ 30s 30 退火 (Tm-5)°C 30s 延伸 72℃ 1min 最终延伸 72℃ 10min 1 保存 4℃ forever - - PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件包括温度、时间和循环数等。
- 延伸的时间设置需根据PCR产物的长度进行设置，通常每kb产物的延伸时间为1分钟。例如PCR产物的长度为1kb，则延伸时间可以设置为1分钟，PCR产物的长度为2kb，则延伸时间可以设置为2分钟，以此类推。
- 对于初次进行的PCR，为尽量确保可以扩增出预期的PCR产物，可以把循环数设置为35。对于需进行半定量或定量的PCR反应循环数一定要进行适当优化，使PCR反应达到平台期。
- PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件包括温度、时间和循环数等。
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