产品货号：
BTN131235
中文名称：
Klenow片段(3'→5'exo-)
英文名称：
Klenow Fragment(3'→ 5'exo-)
产品规格：
100U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物。它保留了DNA聚合酶活性，具有3'→5'外切酶活性，但不具有5'→3'外切核酸酶活性。可以在DNA模板和引物存在的条件下，选择性地催化底物dNTP沿5'→3'方向合成与模板互补的DNA。本制品是重组表达得到。
产品用途：
1．双链DNA 5'突出末端的平滑化。
2．用随机引物制备探针。
3．随机引物标记法。
4．寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
5．双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。
产品组成：
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
活性定义：以合成的Poly d(A-T)DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10nmol的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
使用举例：(随机引物的同位素标记反应)
1．在微量离心管中配制下列反应液
2．95℃保温3分钟。然后冰中急冷5分钟。
3．加入2.5μL 10×Klenow Fragment Buffer。
4．加入2.5μL dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5．加入5μL 111TBq/mmol[α-32P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq，50μCi)
6．加入1μL本制品，反应液共25μL。
7．37℃反应3小时。
8．65℃加热5分钟。
反应液可直接作为探针使用。如有必要，可以通过用我司柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的dCTP。
注意事项：
1．本酶有高度稳定性，稀释时不失活，但剧烈搅拌会失活。
2．由于不含有5'→3'的外切核酸酶活性，因此没有切口平移活性。
3．可用于双链DNA末端以及缺口的修复。
4．与T4 DNA Polymerase相比，对模板高级结构的抵抗性能较好。
5．由于对DNA的亲和性较强，过量使用易发生凝集作用从而抑制反应进行。
6．若用于5'突出末端的修饰时，补平后有时会多加一个碱基。
7．与DNA Polymerase I相同，ddNTPs的掺入不受底物抑制。
相关搜索：Klenow片段(3'→5'exo-)，Klenow Fragment(3'→ 5'exo-)
产品用途：
1．双链DNA 5'突出末端的平滑化。
2．用随机引物制备探针。
3．随机引物标记法。
4．寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
5．双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。
产品组成：
| 成分 | 规格 |
| Klenow片段(5U/μL) | 20μL |
| 10×Klenow Fragment Buffer | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
活性定义：以合成的Poly d(A-T)DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10nmol的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
使用举例：(随机引物的同位素标记反应)
1．在微量离心管中配制下列反应液
| 成份 | 用量 |
| 模板DNA | 25ng |
| 随机引物(6-9mer)(1nmol/μl) | 2μL |
| 补超纯水到 | 14μL |
2．95℃保温3分钟。然后冰中急冷5分钟。
3．加入2.5μL 10×Klenow Fragment Buffer。
4．加入2.5μL dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5．加入5μL 111TBq/mmol[α-32P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq，50μCi)
6．加入1μL本制品，反应液共25μL。
7．37℃反应3小时。
8．65℃加热5分钟。
反应液可直接作为探针使用。如有必要，可以通过用我司柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的dCTP。
注意事项：
1．本酶有高度稳定性，稀释时不失活，但剧烈搅拌会失活。
2．由于不含有5'→3'的外切核酸酶活性，因此没有切口平移活性。
3．可用于双链DNA末端以及缺口的修复。
4．与T4 DNA Polymerase相比，对模板高级结构的抵抗性能较好。
5．由于对DNA的亲和性较强，过量使用易发生凝集作用从而抑制反应进行。
6．若用于5'突出末端的修饰时，补平后有时会多加一个碱基。
7．与DNA Polymerase I相同，ddNTPs的掺入不受底物抑制。
相关搜索：Klenow片段(3'→5'exo-)，Klenow Fragment(3'→ 5'exo-)