产品货号:
BM0309
中文名称:
重组UDG酶
英文名称:
Recombinant Uracil DNA Glycosylase
产品规格:
1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是大肠杆菌(E.coli)来源的重组尿嘧啶-DNA糖基化酶(UNG,UDG),并经过多步纯化精制得到,该酶能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基并释放游离尿嘧啶,常被用于消除PCR扩增引起的气溶胶污染。

在37℃,30min内降解1μg含有尿嘧啶的dsDNA所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

组分 | 规格 |
重组UDG酶(5U/μL) | 200μL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃

95℃温育2min。

- 核酸内切酶活性:将5U 重组UDG酶与200ng超螺旋质粒DNA在37℃下,共同温育4h后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于10%的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。
- 非特异性核酸酶活性:将5U 重组UDG酶与15ng双链DNA片段在37℃温育16h,使用琼脂糖凝胶电泳检测双链DNA底物无变化。
- RNase活性:将5U 重组UDG酶总RNA在37℃温育1h,使用琼脂糖凝胶电泳检测超过90%的RNA仍保持完整。
- 宿主DNA残留:使用大肠杆菌16S rDNA特异性引物探针组,采用荧光定量PCR法检测1U 重组UDG酶,大肠杆菌宿主基因组DNA残留低于10 copies。
- 单链DNA酶活性:将5U 重组UDG酶与1pmol单链寡核苷酸(FAM标记)在37℃孵育16h,经毛细管电泳检测,降解率<5%。

- 按下列体系配制PCR反应液
成分 用量 终浓度 10×PCR Buffer for Taq 5μL 1× dUTP (10mM) 1μL 0.2mM dCTP/dGTP/dATP (10mM each) 1μL (each) 0.2mM Template DNA X ng - Primer 1 (10μM) 1μL 0.2μM Primer 2 (10μM) 1μL 0.2μM Taq DNA Polymerase (5U/μL) 0.2μL 0.02U/μL 重组UDG酶(5U/μL) 0.2μL 0.02U/μL ddH2O 至50μL - - 根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2~0.6mM之间调整。
- 根据实验需要,50μL反应体系中UDG酶的使用量一般为0.1~1U。
- 根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2~0.6mM之间调整。
- PCR反应程序
步骤 温度 时间 循环数 降解含U模板 37℃ 10min 1 UDG失活,模板预变性 95℃ 5min 1 变性 95℃ 10 s 30~35 退火 55~65℃ 30 s 延伸 72℃ 30 s/kb 终延伸 72℃ 5min 1 - 可根据实验需要调整PCR反应程序。
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