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本制品是一种通过经典方法简单、高效、灵敏地可染色细胞核并选择性地对胶原纤维和肌纤维进行染色的试剂盒。本试剂盒对不同组织的石蜡切片和冰冻切片均适用。

本试剂盒组分齐全，提供了Masson染色所需的苏木素染色液、酸性分化液、丽春红-酸性品红染色液、亮绿染色液及磷钨钼酸分化液，用户只需自备各梯度浓度的乙醇溶液即可完成整个实验过程。操作简捷，性能稳定，分化时间短，显色清晰，所染切片保存时间长且不易褪色。

Masson染色是结缔组织染色最经典的一种方法，也是区分胶原纤维和肌纤维权威而经典的技术方法，对于组织学研究和疾病的病理诊断有着重要意义。通过Masson染色可以分析组织中胶原纤维的数量和分布，评估组织的纤维化程度；帮助鉴别组织中的炎症细胞和炎症相关的纤维化变化；显示肿瘤周围或内部的纤维组织反应和结构，辅助判断和诊断肿瘤类型和分级。

Masson染色通过使用苏木素、亮绿以及丽春红-酸性品红三种阴离子染料，选择性地对细胞核、胶原纤维和肌纤维进行染色。染色时根据组织不同的渗透性，不同组织可被分子大小不同的阴离子染料着染，显示不同的颜色。而组织的渗透性取决于组织的结构密度。不同的组织和细胞成分具有不同的孔隙大小，如孔隙小，组织结构致密，渗透性低；孔隙宽，组织结构疏松，渗透性高。小分子量的染料易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量的染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。例如已固定的组织经Masson染色，红细胞、细胞核等被最小分子的阴离子染料苏木素着染，显紫色；肌纤维、胞浆等被中等大小的阴离子染料丽春红-酸性品红染色，显红色；而胶原纤维等则被大分子的阴离子染料亮绿着染，显绿色。

• 请勿-20℃冻存，否则可能会有沉淀析出，影响使用效果。
  
• 丽春红-酸性品红染色液遇水易脱色，染色后用蒸馏水润洗不能超过10秒。
  
• 磷钼酸分化液与酸性分化液的使用次序不能颠倒。磷钼酸分化液一方面可以使被丽春红-酸性品红染色液染上红色的胶原纤维分化成无色或淡红色，而肌纤维等仍呈鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与大分子染料亮绿更易结合。磷钼酸分化液分化后无需水洗。
  
• 亮绿染色液染色后使用酸性溶液分化的目的是除去原浆中的绿色，使染色鲜艳清晰，推荐分化时间为1分钟，可根据染色效果自行调整。
  
• 酸性分化液为易燃液体，须密闭储存于阴凉、干燥、通风良好的地方，建议存放在易燃液体的专用安全柜中，并远离明火、火花、热源、热表面，禁止吸烟。
  
• 酸性分化液有腐蚀性，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。

• 样品处理
  
  • 对于石蜡切片：
    ① 石蜡切片的制备：按常规方法进行取材、固定、洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、烘片等步骤制备石蜡切片。
    ② 二甲苯中脱蜡5～10分钟。
    ③ 换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10分钟。
    ④ 依次浸入无水乙醇5分钟，90%乙醇2分钟，80%乙醇2分钟，70%乙醇2分钟。
    ⑤ 蒸馏水洗涤2分钟。
    
  • 对于冰冻切片：
    ① 冰冻切片的制备：按照常规方法进行取材、速冻、切片、烘片等步骤制备冰冻切片。
    ② 蒸馏水洗涤2分钟。
    ③ 浸入70%乙醇2分钟。
• Masson染色
  
  • 苏木素染色：每个组织切片滴加50μL苏木素染色液，染色5分钟，去除染色液，蒸馏水洗涤5分钟。适量酸性分化液分化30秒，自来水流水冲洗返蓝10分钟，蒸馏水洗涤一遍(数秒钟)。
    
  • 丽春红-酸性品红染色：每个组织切片滴加50μL丽春红-酸性品红染色液，染色10分钟，去除染色液，用蒸馏水润洗数秒(不能超过10秒)。适量磷钼酸分化液分化2分钟，去除分化液。
    
  • 亮绿染色：每个组织切片滴加50μL亮绿染色液，染色1分钟，去除染色液，用蒸馏水润洗数秒。适量酸性分化液分化1分钟，去除分化液。
    
  • 脱水：将组织切片快速依次放入70%、80%、90%乙醇和无水乙醇脱水各10秒，二甲苯透明3遍，每次1～2分钟。
    
  • 封片：可直接显微镜下观察，也可使用中性树胶或其它封片剂封片，尽量避免气泡，随后在显微镜下观察组织切片。