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细菌荚膜多糖银染试剂盒图片
产品货号:
KL2205092
中文名称:
细菌荚膜多糖银染试剂盒
英文名称:
Bacterial Capsular Polysaccharide Silver Staining Kit
产品规格:
10T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

细菌荚膜多糖(CPS)是肺炎链球菌、B群链球菌、猪链球菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌等致病细菌细胞壁外的一层胶状物质,是细菌表面的一种重要构成物质同时也是一种重要的保护性抗原,细菌荚膜多糖银染的原理是银离子(Ag+)可与细菌荚膜多糖形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒,可把细菌荚膜多糖电泳带染成黑褐色。本制品就是根据此原理开发。



产品特点:
  • 即开即用,用户不需要单独准备各个成分,优化操作条件。
  • 可用于各种方法纯化得到的CPS,与本公司的细菌荚膜多糖纯化试剂盒兼容性好。
  • 灵敏度高,能检测到几十ng的细菌荚膜多糖条带。
  • 比常规的银染方法快捷,只有染色和显影两步,只需要20分钟。
  • 本制品足够配制1000mL的工作液,足够10次银染。
  • 本制品只能用于科研。


产品组成:
组分规格
溶液A成分一(干粉)2g
溶液A成分二(10×)100mL
溶液A成分三(10×)100mL
溶液B成分一(10×)100mL
溶液B成分二5mL

保存:室温,有效期1年。

使用方法:
一、CPS纯化
  1. 用自选方法纯化CPS,推荐使用本公司细菌荚膜多糖纯化试剂盒


二、配制溶液A(即染色液)
溶液A需要新鲜配制,不能存放。所需溶液A(染色液)的体积跟PAGE胶的面积大小相关,一般的10cm×10cm的mini-PAGE胶需要20~30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。

  1. 在一干净烧杯中加入下列成分,充分搅拌混匀即可。
    成分用量
    自备去离子水80mL
    溶液A成分一0.2g
    溶液A成分二(10×)10mL
    溶液A组分三(10×)10mL


三、配制溶液B
需要配制的溶液B(显色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关,一般的10cm×10cm的mini-PAGE胶需要20~30mL溶液B。下面的用量是针对配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。

  1. 在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液B需要新鲜配制。
    成分用量
    自备去离子水89.5mL
    溶液B成分一(10×)10mL
    溶液B组分二0.5mL


四、染色
  1. PAGE电泳结束后,将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中,漂洗2次,每次2分钟。
  2. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液A中染色,使溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶,如此染色时间10分钟。
  3. 倒掉溶液A,用去离子水快速漂洗PAGE胶两次,每次半分钟。
  4. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液B中,使溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现,一般需要10分钟左右。
  5. 将PAGE胶置于适当背景下照相。
    • 银染时可能在目标位置先出现空白,属正常现象,随时间会逐渐显色;
    • 如条带连线可尝试减少上样量;
    • 胶底部存在一些小分子,会导致胶底部出现深褐色,属正常显现,观察目标位置的染色情况即可。

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