产品货号:
KFS251
中文名称:
Hoechst33258凋亡细胞染色试剂盒
英文名称:
Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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细胞凋亡时产生最显著的变化是染色体固缩,DNA裂解使细胞核形态产发生变化。本试剂盒提供的荧光染料Hoechst 33258是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物,可作为荧光探针与DNA分子结合。
在凋亡细胞中,细胞膜对Hoechst 33258的摄取增高,并且由于染色体高度浓缩,Hoechst 33258与之结合增强,染色呈强蓝色荧光,而正常细胞只呈微弱荧光,死细胞则不被染色,由此可检测出凋亡。
组分 | 规格 |
Hoechst 33258 | 1mL |
Buffer A | 25mL |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
Hoechst 33258工作液的配制:使用前,取试验盒中Hoechst 33258原液用蒸馏水稀释10倍。
荧光显微镜、低速离心机、微量移液器、1.5mL Microtube、载玻片、盖玻片、4%甲醛溶液。
- 染色时间严格控制,染色过久可导致假阳性。
- 由于不同细胞对Hoechst 33258的摄取能力不同,该法不一定适用所有细胞。
- 用适当的方法诱导细胞凋亡;
- 用冷Buffer A洗涤细胞二次,离心收集106细胞于1.5mL微量离心管中;(贴壁细胞原位固定染色)
- 加入1mL的4%甲醛溶液(用户自备),4℃固定细胞10min;
- 离心去固定液,用Buffer A洗两遍;离心后留50~100μL Buffer A重悬细胞;
- 取上步骤50~100μL细胞悬液涂片,自然晾干;
- 滴加100μL Hoechst 33258工作液,室温染色10min,水冲净晾干;
- 以紫外光340nm波长激发,荧光显微镜下观察。
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