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细胞膜橙红色荧光探针(DiI)图片
产品货号:
KFS151
中文名称:
细胞膜橙红色荧光探针(DiI)
英文名称:
DiI
产品规格:
10mg
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

长链二烷基羰花青化合物,特别是Dil(MW:933.88),广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中,进行顺行或逆行的神经示踪分析。


DiI不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。DiI标记运动神经元,可在培养基条件下持续跟踪长达四周,在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元,0.2~0.6mm/每天/固定标本,在活体组织里,可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织,DiI的扩增可以持续长达1~2年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移,除非质膜被破坏,比如切片部位。




组分规格
细胞膜橙红色荧光探针(DiI)10mg
说明书1份

保存:-20℃,避光,有效期1年。


  1. 制备储液
    固体染料以DMF或者DMSO或乙醇溶解配制为1mM的储液。一旦制成的储液,需避光冷冻,储液形式可保存6个月。
  2. 标记悬浮细胞
    1. 以无血清培养基悬浮细胞密度为1×106个/mL。
    2. 每1mL细胞悬液加入5μL细胞标记液,混匀。
    3. 37℃孵育1~20分钟。不同的细胞类型所用的孵育条件不一样,可参考表格1.初始孵育时间可选择20分钟,随后再进行优化。
    4. 37℃,1500rpm 5分钟离心标记悬浮液。
    5. 去上清,用37℃的培养基轻轻悬浮细胞。
    6. 重复两次以上的洗涤步骤。
    7. 放置10分钟后进行荧光测量。
  3. 标记贴壁细胞
    1. 培养细胞至所需的汇合度。
    2. 取出爬片,吸去培养基,放到盖玻片湿盒中。
    3. 准备标记,每1mL新鲜培养基中加入5μL的标记液。
    4. 吸取100μL盖玻片周围的染色介质,轻轻铺匀,使之盖满整个爬片。
    5. 37℃孵育细胞,不同的细胞类型所用的孵育条件不一样,可参考表格1.初始孵育时间可选择20分钟,随后再进行优化。
    6. 去掉染色介质,用新鲜预热的培养基孵育10分钟,再更换以新的预热的培养基孵育10分钟,重复洗涤盖玻片三次。



表1.优化的细胞染色孵育时间
Cell LineOptimal incubation time
Jurkat2minutes
HeLa8minutes
P3X15minutes
3T315minutes


表2.DiO,DiI,DiD and DiR光谱特性
TracerEx(nm)Em(nm)Optical Filters
OmegaChroma
DiO484501XF2331001
DiI549565XF3231002
DiD644665XF4731023
DiR750780XF11241009

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