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ER-Red染料是细胞渗透性的活细胞染料，对内质网(ER)有高度选择性；如用手册提供的方法进行染色，染色图案在甲醛固定后部分保留。该染料含红色荧光BODIPY TR Ceramide染料和格列本脲。格列本脲(优降糖)能结合到内质网上突出的ATP-敏感K+通道的磺脲类受体上；格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特化细胞中磺脲类受体的可变表达可能导致非内质网标记。

ER-Red对于细胞的毒性极低。而传统的DiOC6(3)对ER染色的同时也对细胞有一定的毒性。ER-Red呈红色荧光，检测时的最大激发波长为587nm，最大发射波长为615nm。ER-Red按照后附的使用说明染色后，用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留。

1. ER-Red (1mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可20～25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
   
2. 荧光染料可能发生淬灭，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
   
3. 需自备盖玻片和载玻片。
   
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. ER-Red工作液的配制：
   
   1. 取少量ER-Red，以HBSS或不含酚红血清的合适培养基，按照1:1000比例进行稀释。
      
   2. ER-Red工作液使用前需37℃预温育。
      注：工作液中ER-Red的浓度可以根据实际情况进行适当调整，推荐的稀释比例调整范围为1:1000～1:3000。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的ER- Red。
2. 内质网的荧光标记：
   
   1. 去除细胞培养液，用适量的溶液如HBSS with Ca²⁺ & Mg²⁺洗涤生长在盖玻片上的细胞。对于悬浮细胞的染色可以参考贴壁细胞的染色方法进行。
      
   2. 去除洗涤液，加入步骤1配制好的并37℃预温育的ER-Red染色工作液，与细胞37℃共孵育15～30分钟。
      
   3. 去除ER- Red染色工作液，用细胞培养液洗涤细胞1～2次。
      
   4. 随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到内质网呈明亮的强荧光染色。
      
   5. 如需固定，可以使用4%甲醛37℃固定2分钟。固定后用适当的洗涤液洗涤2～3次，每次5分钟，随后可以进行复染或滴加适当的抗荧光淬灭封片液，最后封片观察。注意：ER-Red染色的细胞不能用Triton X-100通透，Triton X-100通透处理会导致ER-Red的荧光染色消失。