产品目录

DiOC6(3)是一种细胞渗透性绿色荧光亲脂染料，也是一种被广泛应用的膜电位染料。在低浓度时，DiOC6(3)对活细胞内的线粒体染色具有选择性；在高浓度时，该染料可以在活细胞或固定的细胞中染色其他细胞器内膜，如内质网等。此外，DiOC6(3)也被用来研究神经元或酵母中内质网结构的相互作用和动力学。

1. 对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
   
2. 荧光染料可能发生淬灭，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
   
3. 需自备盖玻片和载玻片。
   
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 制备1mM DiOC6(3)储液：10mg DiOC6(3)以无水DMSO制备成1mM的DiOC6(3)储液，-20℃避光保存。
   储液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可用20～25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. DiOC6(3)工作液的配制：
   
   1. 取少量DiOC6(3)，用HBSS或不含酚红、血清的培养基，按照1:1000比例进行稀释。
      工作液中DiOC6(3)的浓度可以根据实际情况进行适当调整，推荐的稀释比例调整范围为1:1000～1:3000。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的DiOC6(3)。
   2. DiOC6(3)工作液使用前需37℃预温育。
3. 内质网的荧光标记：
   
   1. 去除细胞培养液，用适量的溶液如HBSS洗涤细胞1～2次。
      
   2. 去除洗涤液，加入步骤1配制好的DiOC6(3)染色工作液，与细胞在37℃共孵育15～30min。
      
   3. 去除DiOC6(3)染色工作液，用细胞培养液洗涤细胞1～2次。
      
   4. 随后用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到内质网呈明亮的强荧光染色。
      
   5. (可选)如需固定，可以使用4%甲醛37℃固定2min。固定后用适当的洗涤液洗涤2～3次，每次5min，随后可以进行复染或滴加适当的抗荧光淬灭封片液，最后封片观察。
      DiOC6(3)染色的细胞不能用Triton X-100通透，Triton X-100通透处理会导致DiOC6(3)的荧光染色消失。