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DiOC6(3)是一种膜可透性，绿色荧光，低浓度下可选择性染色活细胞的线粒体的亲脂性染料。高浓度下，也可以用于染色其他细胞器内膜，如内质网。

1. 储液ER-Green (1mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可20～25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
   
2. 荧光染料可能发生淬灭，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
   
3. 需自备盖玻片和载玻片。
   
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 制备ER-Green储液：10mg ER-Green以无水DMSO制备成1mM的ER储液，-20℃避光保存。
   
2. ER-Green工作液的配制：
   
   1. 取少量ER-Green，以HBSS或不含酚红血清的合适培养基，按照1:1000比例进行稀释。
      
   2. ER-Green工作液使用前需37℃预温育。
      注：工作液中ER-Green的浓度可以根据实际情况进行适当调整，推荐的稀释比例调整范围为1:1000～1:3000。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的ER- Red。
3. 内质网的荧光标记：
   
   1. 去除细胞培养液，用适量的溶液如HBSS with Ca²⁺ & Mg²⁺ (Hanks’ Balanced Salt Solution with Ca²⁺ & Mg²⁺)洗涤生长在盖玻片上的细胞。对于悬浮细胞的染色可以参考贴壁细胞的染色方法进行。
      
   2. 去除洗涤液，加入步骤1配制好的并37℃预温育的ER-Green染色工作液，与细胞37℃共孵育15～30分钟。
      
   3. 去除ER- Green染色工作液，用细胞培养液洗涤细胞1～2次。
      
   4. 随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到内质网呈明亮的强荧光染色。
      
   5. 如需固定，可以使用4%甲醛37℃固定2分钟。固定后用适当的洗涤液洗涤2～3次，每次5分钟，随后可以进行复染或滴加适当的抗荧光淬灭封片液，最后封片观察。注意：ER-Green染色的细胞不能用Triton X-100通透，Triton X-100通透处理会导致ER-Green的荧光染色消失。