产品货号：
HR8622
中文名称：
细胞膜染色试剂CM-DiI
英文名称：
产品规格：
200μl
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
细胞膜荧光染料CM-DiI是一种新型细胞膜染料，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞，适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性，可用以追踪多次传代细胞的运动特性。其有着强而稳定的红色荧光(Ex/Em=553/570nm)，与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性，适合做多重指标染色。
CM-Dil水溶性较好，便于悬浮细胞和固定细胞染色溶液的制备；工作浓度下，此染料无细胞毒性，不会影响细胞活力以及增殖能力。一些细胞经CM-Dil染色后，可在后续的固定，透化和石蜡包埋处理中维持稳定的标记，因此特别适用于同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化，荧光原位杂交或者电镜观察的实验。
研究证实，CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
CM-DiI标记细胞呈红色荧光，荧光波长：λex=553nm,λem=570nm。
储存条件：-20避光保存。
有效期：一年。
※ ※ ※使用前请仔细阅读产品说明书※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器
● 流式细胞仪或荧光显微镜或激光共聚焦●离心机● 移液器●冰箱●冰盒
耗材
●离心管● 吸头
试剂
● PBS(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液)；
●或者HBSS(With：Calcium Magnesium Glucose；Without：Phenol Red。)
使用方法：
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
●染色浓度根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。
● CM-DiI溶解液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以37℃水浴片刻至全部融解后使用。
● 不同的细胞种类标记后可以示踪的代次或时间差异较大，请根据实际情况或参考文献进行检测。
细胞测定
1．试剂配制：
从冰箱中取出CM-DiI试剂，静置几分钟至室温，或者37℃水浴片刻后，离心盛放CM-DiI的管子，开盖前请务必离心几分钟让试剂充分落入管底后才能开盖。
2．根据需要检测的细胞样品数，用合适的溶液(如：无血清培养基，HBSS或PBS)将CM-DiI母液100倍稀释，配制成染色工作液。
【注】：
● 最佳的工作液浓度请根据不同细胞和自身的实验体系来调整。
● 一般细胞终浓度100倍稀释即可，有些细胞可能需要适当增加浓度。
3．将制备好的待测细胞用100μl染色工作液重悬，至细胞浓度大约107/ml。
【注】：
● 也可以进行原位染色，染色液足够覆盖细胞即可。
4．在2-8℃培养箱中孵育15-30分钟。
【注】：
● 建议待标记细胞在染色工作液中于37℃孵育5min，再于4℃孵育15min。
●低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性。
5．离心后去上清，收集细胞，用PBS或无血清培养基洗涤细胞1-2次，最后加入PBS或无血清培养基重悬细胞。
6．取500μl细胞悬液，用荧光显微镜/流式细胞仪检测。Ex/Em=553/570nm。
7．随后还可按照细胞的正常培养方法进行培养。
【注】：
●可以在荧光显微镜下直接观察标记效果，也可以在培养适当时间后再用流式细胞仪检测细胞荧光。
●可以根据自身的实验要求以及细胞类型，进行后续的实验如石蜡包埋-免疫组化分析，电镜分析等。有报道提到，经CM-DiI染色后的大鼠嗜铬细胞瘤细胞可兼容2%(w/v)多聚甲醛和0.2%(w/v)Triton X-100的透化作用；从绵阳淋巴细胞内再次纯化的CM-DiI标记细胞，经甲醛固定，石蜡包埋，切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇，以及脱水后仍能维持荧光。
相关搜索：细胞膜染色试剂CM-DiI
CM-Dil水溶性较好，便于悬浮细胞和固定细胞染色溶液的制备；工作浓度下，此染料无细胞毒性，不会影响细胞活力以及增殖能力。一些细胞经CM-Dil染色后，可在后续的固定，透化和石蜡包埋处理中维持稳定的标记，因此特别适用于同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化，荧光原位杂交或者电镜观察的实验。
研究证实，CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
CM-DiI标记细胞呈红色荧光，荧光波长：λex=553nm,λem=570nm。
储存条件：-20避光保存。
有效期：一年。
※ ※ ※使用前请仔细阅读产品说明书※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器
● 流式细胞仪或荧光显微镜或激光共聚焦●离心机● 移液器●冰箱●冰盒
耗材
●离心管● 吸头
试剂
● PBS(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液)；
●或者HBSS(With：Calcium Magnesium Glucose；Without：Phenol Red。)
使用方法：
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
●染色浓度根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。
● CM-DiI溶解液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以37℃水浴片刻至全部融解后使用。
● 不同的细胞种类标记后可以示踪的代次或时间差异较大，请根据实际情况或参考文献进行检测。
细胞测定
1．试剂配制：
从冰箱中取出CM-DiI试剂，静置几分钟至室温，或者37℃水浴片刻后，离心盛放CM-DiI的管子，开盖前请务必离心几分钟让试剂充分落入管底后才能开盖。
2．根据需要检测的细胞样品数，用合适的溶液(如：无血清培养基，HBSS或PBS)将CM-DiI母液100倍稀释，配制成染色工作液。
【注】：
● 最佳的工作液浓度请根据不同细胞和自身的实验体系来调整。
● 一般细胞终浓度100倍稀释即可，有些细胞可能需要适当增加浓度。
3．将制备好的待测细胞用100μl染色工作液重悬，至细胞浓度大约107/ml。
【注】：
● 也可以进行原位染色，染色液足够覆盖细胞即可。
4．在2-8℃培养箱中孵育15-30分钟。
【注】：
● 建议待标记细胞在染色工作液中于37℃孵育5min，再于4℃孵育15min。
●低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性。
5．离心后去上清，收集细胞，用PBS或无血清培养基洗涤细胞1-2次，最后加入PBS或无血清培养基重悬细胞。
6．取500μl细胞悬液，用荧光显微镜/流式细胞仪检测。Ex/Em=553/570nm。
7．随后还可按照细胞的正常培养方法进行培养。
【注】：
●可以在荧光显微镜下直接观察标记效果，也可以在培养适当时间后再用流式细胞仪检测细胞荧光。
●可以根据自身的实验要求以及细胞类型，进行后续的实验如石蜡包埋-免疫组化分析，电镜分析等。有报道提到，经CM-DiI染色后的大鼠嗜铬细胞瘤细胞可兼容2%(w/v)多聚甲醛和0.2%(w/v)Triton X-100的透化作用；从绵阳淋巴细胞内再次纯化的CM-DiI标记细胞，经甲醛固定，石蜡包埋，切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇，以及脱水后仍能维持荧光。
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