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含铁血黄素(hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内或间质内，主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反应被称为普鲁士蓝反应。价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反应后可用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中性红等。普鲁士蓝染色试剂常用于显示局部组织内的各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时，用Perls反应可以得到证实，该染色法可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染。

• 组织避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理会妨碍铁的保存。
  
• 整个操作过程中容器要干净，避免使用金属铁制品。
  
• 洗切片和容器时使用蒸馏水，因自来水内含铁质。
  
• 普鲁士蓝工作液需要现配现用，不可提前配制。
  
• 普鲁士蓝染色时间根据样本情况调整。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

• 切片置60℃烘箱1h。
  
• 脱蜡：二甲苯Ⅰ15min →二甲苯Ⅱ15min →无水乙醇Ⅰ5min →无水乙醇Ⅱ5min → 95%乙醇5min → 85%乙醇5min → 75%乙醇5min →去离子水
  
• 普鲁士蓝染色工作液：临用前，10%亚铁氰化钾与20%盐酸按1:1混合，现配现用。
  
• 普鲁士蓝工作液室温染色15～30min。
  
• 蒸馏水浸泡5min×3次。
  
• 1%中性红染色液室温染色2～5min，视组织而定。
  
• 蒸馏水冲洗1～5 s。
  
• 常规脱水透明，中性树胶封固。脱水、透明、封片，显微镜观察。