产品货号:
GL2583
中文名称:
心肌ATPase染色液
英文名称:
产品规格:
2×50mL
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1~3天
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心肌ATPase染色液(镁激活法)的原理是心肌ATPase被镁离子激活,ATPase水解底物ATP为ADP和磷酸,并放出能量,磷酸与铅离子结合,在酶活性部位形成无色的磷酸铅,再经硫化液处理,转化为棕黑色的硫化铅沉淀在酶活性处显色,镁激活法的ATPase在正常肝定位于毛细胆管,因而对其显示特别清晰,在肝癌或肝组织早期受损,毛细胆管被破坏,ATP酶活性下降或消失,可作为肝细胞受损的象征,此方法也可显示皮肤表皮内的朗格汉斯细胞。
三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)是催化ATP合成的一种水解酶,根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等,线粒体三磷酸腺苷酶在心肌最丰富,肝脏次之,但较难显示出来,心肌细胞线粒体ATPase与肌球蛋白ATPase相反,被镁离子激活而被钙离子抑制;肝细胞线粒体ATPase均可被钙镁离子激活,该染色液适用于将心肌线粒体ATPase显示出来。
ATPase水解ATP反应如下:
A-P-P-P + H2O → A-P-P + H3PO4 +能量
组分 | 规格 |
ATPase孵育液 | 50mL |
硫化溶液 | 2×1mL |
对照液 | 10mL |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
- 冰冻切片、恒温箱或水浴锅、
- 蒸馏水、梯度乙醇、二甲苯或环保脱蜡透明液、中性树胶
- ATPase孵育液、ATPase硫化液易失效,最好分成小份储存,一经开启立即使用。
- ATPase硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。
- 冰冻切片染色前,应减少切片在室温暴露的时间。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 取新鲜组织,低温恒冷冰冻切片(用液氮快速冷冻效果更佳),厚度6μm,连续切片贴于玻片上,分别命名为A玻片、B玻片,凉风吹干30min。
- 硫化溶液用蒸馏水稀释50倍,即为ATPase硫化工作液,即配即用,不易久置;ATPase孵育液和对照液提前预温至37℃。
- A玻片浸入ATPase孵育液,B玻片浸入对照液,37℃孵育10~60min。
- 用蒸馏水洗涤2次,每次1~2min。
- 入硫化工作液孵育1min,流水洗5min,常规脱水透明,中性树胶封固。
镁激活的ATPase活性处呈棕黑色,在肝毛细胆管处该酶呈树枝状分布。
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