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结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维，该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，然而淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝)，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

• 染色稳定；
  
• 分化时间短，1～2s；
  
• 色彩清晰鲜艳；
  
• 适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；
  
• 所染切片保存时间长且不易褪色。

• 切片脱蜡应尽量干净。固定起着重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
  
• 取Weigert染液A、B等量混合即为Weigert铁苏木素染液，一般24h失去染色力。
  
• 酸性乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
  
• 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
  
• 磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定，一般1～2min。
  
• Masson蓝化液亦可自行配制Scott促蓝液或0.1～1%碳酸锂水溶液予以替代。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 切片常规脱蜡至水，用配制好的Weigert铁苏木素染色5～10min。
  
• 用酸性乙醇分化液分化数秒，水洗。
  
• 用Masson蓝化液返蓝数秒，水洗，蒸馏水洗1min。
  
• 丽春红品红染色液染色5～10min。
  
• 在上述操作过程中按蒸馏水∶弱酸溶液=2∶1比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗1min。
  
• 磷钼酸溶液洗1～2min。
  
• 用配制好的弱酸工作液洗1min。
  
• 直接入固绿染色液中染色1～2min。
  
• 用配制好的弱酸工作液洗1min。
  
• 95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5～10s。
  
• 二甲苯或脱蜡透明液透明3次，每次1～2min，中性树胶封固。