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钙盐染色液(改良茜素红S法)采用改良McGee-Russell法，用茜素红S和Mayer苏木素染色结合染色，茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物；该染色液尤其适用于少量钙盐组织的染色。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在，一种是离子钙，存在血液循环内，即所谓血钙；另一种是结合钙，和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。除骨骼和牙齿外正常时钙渗透在所有组织和细胞中，一般不以固体状态出现在组织内；但在某些情况下，钙析出成固体并沉着于组织内，则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙，其次为碳酸钙，钙盐通常是单折射的，但草酸钙是双折射的。当使用HE染色时钙一般呈紫蓝色，许多染料可与钙形成螯合物，包括茜素红S、红紫素、核固红等，一般来说这些染料在识别中至大量的钙时，效果优于轻微染色的微量钙沉积，但茜素红S往往对少量的沉积物可得到更可靠的结果。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法。

• 茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定，可在显微镜下观察见钙盐呈较深的橙红色即取出水洗，如染色时间过长就出现弥散现象，一般1～2min即可。
  
• 在不溶性钙染色中，茜素红S的染色时间要根据钙盐的含量来确定，在病理性钙化及骨化的病理诊断及科研中常使用该法，如骨折的修复、骨化性肌炎、陈旧性瘢痕组织固化等。
  
• McGee-Russell分化和Mayer苏木素染色不是必须步骤。
  
• 经过茜素红S染色液染色后，钙沉积物是双折射的。
  
• 茜素红S法在辨别和检测少量钙时特别有用，如检查肾中的异常钙化(尿钙过多)。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 常规染色
  
  • 组织固定于10%中性福尔马林固定液，常规脱水包埋。
    
  • 切片厚5μm，常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水。
    
  • 切片用茜素红S染色液滴染1～5min，稍水洗。
    
  • McGee-Russell分化液迅速分化数秒。
    
  • Mayer苏木素染色液浅染胞核1～2min，流水冲洗10min。
    
  • 常规脱水，二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固。
• 不溶性钙染色
  
  • 组织固定于10%中性福尔马林固定液，常规脱水，其中注意在95%乙醇中脱水应充分。
    
  • 塑料包埋，室温过夜，37℃烤箱中聚合2～4天，-20℃冰箱冷却15～20min。
    
  • 切片厚度3～5μm，未脱钙骨切片脱塑至水，蒸馏水洗。
    
  • 切片入茜素红S染色液1～10min，蒸馏水洗。
    
  • (备选)McGee-Russell分化液迅速分化数秒。
    
  • (备选)Mayer苏木素染色液浅染胞核1～2min，流水冲洗10min。
    
  • 常规脱水，二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树胶封固。