产品货号:
GL0501
中文名称:
酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
英文名称:
产品规格:
3×10mL|3×20mL
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1~3天
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酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)又称非特异性酯酶染色液,该染色液对酯酶染色无特异性,故又称作非特异性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可作氟化钠抑制试验。

酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与六偶氮副品红偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于细胞质。

酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase),每一种酯酶常能水解许多不同的底物,多种不同的酯酶又能水解相同的底物,因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶,非特异性酯酶的最适pH为5.0~8.0,定位于溶酶体和内质网,在肝脏、肾脏、胰和小肠具有较高的酶活性,单核-吞噬细胞系统的单核巨噬细胞、树突细胞也含有丰富的非特异性酯酶。

| 组分 | 3×10mL | 3×20mL | 保存条件 | |
| 试剂(A):ANAE固定液 | 10mL | 20mL | RT,避光 | |
| 试剂(B):ANAE孵育液 | B1:Pararosaniline Solution | 0.05mL | 0.1mL | 4℃,避光 |
| B2:Nitrite Solution | 0.05mL | 0.1mL | 4℃,避光 | |
| B3:α-NAE Solution | 0.5mL | 1mL | 4℃,避光 | |
| B4:ANAE Buffer | 9.5mL | 19mL | RT | |
| 试剂(C):甲基绿染色液 | 10mL | 20mL | RT,避光 | |
| 试剂(D):NaF Solution | 0.2mL | 0.4mL | RT,避光 | |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。

临用前,按B1∶B2∶B3∶B4=1∶1∶10∶190充分混合,即为ANAE孵育液,即配即用。
- 注意应先B1∶B2=1∶1混匀后,再与B3、B4混匀。

- 血液或骨髓细胞涂片应新鲜,薄厚适宜,一般2天内染色,否则会影响酶的活性。
- ANAE孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
- ANAE孵育液配制后易出现浑浊,但不会影响染色效果。
- 单核细胞为中度阳性至强阳性,对NaF敏感,正常粒细胞呈阴性反应。
- 每次染色时,应有阳性对照片。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

- 血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切入ANAE固定液固定10~15min。
- 水洗5min。
- 入配制好的ANAE孵育液放入湿盒中,室温(15~25℃)避光孵育1h,水洗。
- 入甲基绿染色液复染5~15min,水洗,镜检。

| 细胞质 | 暗红色/棕色 |
| 细胞核 | 绿色 |

按NaF Solution∶ANAE孵育液=1∶25的比例,在ANAE孵育液中加入NaF Solution,其余按上述染色法进行。
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