产品货号:
GL0498
中文名称:
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)
英文名称:
产品规格:
4×50mL
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1~3天
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细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化,进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine聚合物,此酶对固定剂敏感,故须用新鲜切片。
细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase,CO)被认为是线粒体膜固有的酶,在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性,此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标,亦作为线粒体的标志酶之一。
组分 | 规格 | 保存 |
DAB染色液 | 30mL | -20℃避光 |
CO清除液 | 10mL | |
DAB增强剂 | 10mL | |
苏木素染色液 | 50mL | 4℃ |
CO对照液 | 1mL | RT |
保存:-20℃,避光,有效期6个月。
DAB孵育液:按DAB染色液∶CO清除液∶DAB增强剂=3∶1∶1混合,即为DAB孵育液,临用前配制。
恒温培养箱或水浴锅、蒸馏水、中性树胶或甘油明胶
- 该染色液适用于冰冻切片,同时应减少切片在室温暴露的时间。
- CO孵育液孵育时间因组织而异,心肌、肾孵育约30~60min,肝脏约50~60min,甲状腺滤泡上皮约2h。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 冰冻切片,厚6μm,不固定。
- 切片入已37℃温浴的DAB孵育液中,37℃避光孵育60~120min,蒸馏水稍洗3~5s。
- 可选:滴加苏木素染色液浅染细胞核3~5min,流水冲洗10min。
- 封固、镜检。
CO酶活性部位 | 棕色 |
心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体) | 蓝色 |
取新鲜配制好的DAB孵育液,按DAB孵育液∶CO对照液=50∶1的比例混合,即为CO对照工作液;相同切片入CO对照工作液,其余同上,呈阴性反应。
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