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EDTA脱钙液(10%)主要由EDTA二钠盐、磷酸盐等组成，pH值为7.2，是一种螯合脱钙剂，用于组织慢速脱钙，适用于HE染色、免疫组化、原位杂交、电镜、骨的酶组织化学染色等。

• 经EDTA脱钙的组织染色结果好。
  
• 对组织的结构损害小。
  
• 适用于免疫组化和原位杂交染色。

• 脱钙速度很慢，不适合常规标本脱钙使用。
  
• 脱钙后组织会稍微变硬。
  
• 不宜用化学方法确定脱钙终点。

在组织切片过程中，一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片，这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后，再进行脱钙或二者同时进行，然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片；用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙，EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响最小，可以较好的保存组织的某些酶类，经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色，但是该法脱钙速度太慢，一般脱需要数周至数月。

• 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10～30天即可，大多数在14～60天即可。
  
• 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。
  
• 脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。
  
• 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。
  
• 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。
  
• 每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。
  
• 组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。
  
• 组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。
  
• 组织转移至20～30倍体积的EDTA脱钙液中，脱钙10～30天或更长时间。如果想加快脱钙速度，可以置于37℃进行脱钙；如果必要，更换新的EDTA脱钙液继续脱钙，多数组织脱钙2周～3个月即可，每周更换一次直至终点；
  亦可采用微波快速脱钙法：微波炉设在200W左右的档位，每次加热5min，依据组织厚度和密度重复3～5min，中间间隔3～5min。
  
• 用蒸馏水冲洗数次。
  
• 常规脱水、包埋。