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结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维，该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织；Pollak三色染色是在Masson三色染色法基础上改良而来的结缔组织多色染色法，采用媒染剂和促染剂同时染色，可使结缔组织中的多种成分着色。

• 把Masson三色染色核心染料融合在一起，大大简化了操作步骤。
  
• 染色稳定。
  
• 分化时间短，1～2s。
  
• 适宜于石蜡切片。
  
• 所染切片保存时间长且不易褪色。

• 切片脱蜡应尽量干净。Weigert铁苏木素染液即配即用，一般24h失去染色力。
  
• 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
  
• 采用Weigert染细胞核，因为染色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维，一般也可以省略该染色步骤。
  
• 酸性乙醇的分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
  
• Pollak染色液的染色时间应严格控制：染色时间过短，导致红色加深；染色时间过长，导致绿色或蓝色加深。
  
• Pollak分化液可使色彩更清晰鲜艳，如用量大可自行配制0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 切片常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水。
  
• 用配制好的Weigert铁苏木素染色5～10min。
  
• 充分水洗，镜下观察；如果染色过深，可用酸性乙醇分化液分化数秒。
  
• 水洗返蓝，蒸馏水洗2～4次。
  
• 入Pollak染色液染色3～10min。
  
• 在上述操作过程中按蒸馏水∶Pollak分化液=2∶1比例配制Pollak分化工作液，用Pollak分化工作液洗数秒，以镜下观察适当为宜。
  
• 95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5～10s。
  
• 二甲苯或脱蜡透明液透明3次，每次1～2min，中性树胶封固。