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碘化丙啶染色液(1mg/mL)图片
产品货号:
GL0326
中文名称:
碘化丙啶染色液(1mg/mL)
英文名称:
Propidium Iodide Stain Solution
产品规格:
1mL|10mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品主要由PI、破膜剂等组成,经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测,亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死,其工作浓度多为20~50μg/mL,不含RNase,推荐用于RNA染色,细胞检测含量范围一般为0.1~1×106之间。




碘化丙啶染色(PI Stain)可以对细胞周期与细胞凋亡进行分析,碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料,无碱基特异性。碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比,细胞内的DNA被Propidium Iodide染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡的分析,碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1~2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。


细胞凋亡时流式细胞检测可呈现亚二倍体核型的特征,根据光散射的特点,PI染色可以区分细胞凋亡和细胞坏死的细胞峰型。细胞凋亡时出现凋亡细胞皱缩、染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的前向光散射低于正常;在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化;在细胞凋亡的晚期前向和侧向光散射的信号均降低;细胞坏死时细胞多表现为细胞肿胀,因此前向光散射高于正常,对侧向光散射高于正常。




组分1mL10mL
碘化丙啶PI染色液(1mg/mL)1mL10×1mL
说明书1份1份

保存:-20℃,避光,有效期1年。


胰蛋白酶消化液、PBS、预冷固定液:预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛、流式细胞仪


  • 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
  • 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
  • 在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离心力或延长离心时间。
  • 如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化后,制备成单细胞悬液,才可以进行检测。
  • 细胞凋亡时,凋亡细胞的标志之一是DNA可染行降低,但这种情况并是绝对的,DNA含量的降低或者DNA与染料结合能力下降也会导致DNA可染行降低,在分析的时候应特别注意。
  • PI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



  • 细胞样品的制备:
    • 贴壁细胞:
      • 小心收集细胞培养液到一个无菌离心管内备用。
      • 用胰蛋白酶消化细胞至可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞,收集上述细胞悬液到离心管内。
      • 4℃ 1000g离心3~5min,使细胞沉到管底,小心吸取上清并丢弃,可留大约50μL培养液,以免吸走细胞。
      • 加入约1mL提前预冷的PBS,重悬细胞,并转移至1.5mL无菌离心管。
      • 4℃ 1000g离心3~5min,使细胞沉到管底,小心吸取上清并丢弃,可留大约50μL PBS,以免吸走细胞。
      • 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
    • 悬浮细胞:
      • 4℃ 1000g离心3~5min,使细胞沉到管底。
      • 小心吸取上清并丢弃,可留大约50μL培养液,以免吸走细胞。
      • 加入约1mL提前预冷的PBS,重悬细胞,并转移至1.5mL无菌离心管。
      • 4℃ 1000g离心3~5min,使细胞沉到管底,小心吸取上清并丢弃,可留大约50μL PBS,以免吸走细胞。
      • 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
  • 细胞的固定:加入1mL冰浴预冷70%乙醇中,轻轻吹打混匀,4℃条件下固定2h或更长时间;4℃固定12~24h可能效果更佳。
  • 细胞的清洗:
    • 4℃,1000g离心3~5min,使细胞沉到管底。
    • 小心吸取上清并丢弃,可留大约50μL溶液,以免吸走细胞。
    • 加入约1mL提前预冷的PBS,重悬细胞,并转移至1.5mL无菌离心管。
    • 4℃ 1000g离心3~5min,使细胞沉到管底,小心吸取上清并丢弃,可留大约50μL PBS,以免吸走细胞。
    • 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
  • PI染色:在每个待检细胞样品中加入500μL配制好的PI染色工作液,轻轻重悬细胞沉淀,置于37℃避光水浴30min,在24h内进行染色或流式细胞仪分析。
  • 检测与分析:用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光,同时检测光散射情况,采用适当分析软件进行细胞DNA或RNA含量分析和光散射分析。



凋亡细胞G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型,在光散射谱上,前向光散射低于正常,侧向光散射高于正常。
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