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本试剂盒用简便快速的方法即可快速从各种微藻提取得到线粒体，提取试剂盒提取的线粒体具有生物活性，可以用于线粒体功能研究、线粒体蛋白提取等各种下游应用。

• 仪器准备：离心机、振荡器、Dounce匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒
  
• 试剂准备：PBS缓冲液
  
• 耗材准备：离心管、吸头、一次性手套

• 试剂拆封后请尽快使用完！
  
• 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
  
• 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
  
• 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗等其他用途！

• 取对数生长中期的微藻样品，在2000×g离心5分钟，去上清，收集沉淀微藻。
  
• 沉淀用PBS洗涤一次。
  
• 在3～5g微藻细胞沉淀中加入5mL微藻洗涤液A，充分混匀。
  
• 室温静置2～3分钟。
  
• 在2000×g离心10分钟，去上清，收集沉淀微藻。
  
• 在沉淀中加入10mL微藻线粒体提取液B，充分混匀。
  
• 线粒体提取液B在300 w，超声3 s，间隔3s条件超声处理1～15分钟。
  
• 将线粒体提取液B用40μm细胞筛过滤。
  
• 将滤液在800×g离心3分钟，弃沉淀，保留上清。
  
• 将上清在3000×g离心10分钟，弃沉淀，收集上清。
  
• 将上清在11000×g离心20分钟，弃上清，收集沉淀。
  
• 用1mL线粒体提取液C重悬沉淀。
  
• 在11000×g离心20分钟，弃上清，收集沉淀。
  
• 弃上清，沉淀即为线粒体。
  
• 用0.5mL线粒体保存液D或其他相应的缓冲液重悬线粒体，置冰箱备用或直接用于下游实验。
  
  • 也可以不用试剂盒中的线粒体保存液，根据下游实验需要，将线粒体直接用于下游实验或者用自己的缓冲液保存线粒体。