产品货号:
HR9113
中文名称:
微藻叶绿体提取试剂盒
英文名称:
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒用简便快速的方法即可快速从各种微藻提取得到叶绿体,提取的叶绿体具有生物活性,可以用于叶绿体功能研究、叶绿体蛋白提取等各种下游应用。
叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作用就是在叶绿体中进行的,由于具有这一重要功能,所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。
组分 | 50T | 100T |
微藻洗涤液A | 250mL | 500mL |
叶绿体提取液B | 500mL | 1000mL |
叶绿体提取液C | 250mL | 500mL |
叶绿体保存液D | 100mL | 200mL |
保存:2~8℃,有效期1年。
- 仪器准备:离心机、振荡器、Dounce匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒
- 试剂准备:PBS缓冲液
- 耗材准备:离心管、吸头、一次性手套
- 试剂拆封后请尽快使用完。
- 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
- 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗等其它用途。
以下部分操作步骤针对不同的微藻样品种类需要根据预实验情况调整操作条件。
- 取对数生长中期的微藻,置于4℃冰箱中避光静置24~36小时。
- 在2000×g离心5分钟,去上清,收集沉淀微藻。
- 沉淀用PBS洗涤一次。
- 在3~5g微藻细胞沉淀中加入10mL微藻洗涤液A,充分混匀。
- 室温静置2~3分钟。
- 在2000×g离心10分钟,去上清,收集沉淀微藻。
- 在沉淀中加入10mL微藻提取液B,充分混匀。
- 叶绿体提取液B在300w,超声3s,间隔3s条件超声处理1~15分钟。
- 将叶绿体提取液B用40μm细胞筛过滤。
- 将滤液在800×g离心3分钟,弃沉淀,保留上清。
- 将上清在3000×g离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
- 用5mL叶绿体提取液C重悬沉淀。
- 在3000×g离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
- 弃上清,沉淀即为叶绿体。
- 用2mL叶绿体保存液D或其他相应的缓冲液重悬叶绿体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
- 也可以不用试剂盒中的叶绿体保存液,根据下游实验需要,将叶绿体直接用于下游实验或者用自己的缓冲液保存叶绿体。
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