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钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法)是利用样本中钙离子在碱性条件下能与甲基麝香草酚蓝(MTB)结合，生成蓝紫色的复合物，加入镁离子螯合剂，去除镁离子背景干扰，通过酶标仪检测610nm处的吸光度，根据公式计算出总钙含量。
钙(Calcium)是一种金属元素，常温下呈银白色晶体，动物的骨骼、蛤壳、蛋壳都含有碳酸钙。检测生命体钙含量，主要通过检测钙离子浓度实现的，用分光度法检测钙较为常见，该法需要合适的金属指示剂或选择性结合钙离子后引起变色的染料化合物，目前较为常用的染料有邻-甲酚酞络合铜(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚蓝等。
本试剂盒仅用于科研领域，不可用于临床诊断或其他用途。

组份	100T
组份A：钙标准液(5mmol/L)	1mL
组份B：钙检测缓冲液	10mL
组份C：MTB显色液	10mL
组份D：双蒸水	1mL
组份E：匀浆液缓冲液	100mL

组分A 2～8℃保存，组分B、D、E室温；组分C 2～8℃避光。有效期1年。


酶标仪，蛋白定量试剂盒，96孔板


● 如果样品浓度过高，可以用蒸馏水稀释后再检测，结果乘以稀释倍数即可。


一、试剂配制：
钙显色工作液的配制：
临用前，取试剂B钙检测缓冲液和试剂C：MTB显色液等量混合，即为钙显色工作液，现用现配，2～8℃避光保存，不宜久置；
二、样本处理：
1.取100mg组织样本，加入1mL匀浆缓冲液E，用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
2.在8000g离心5分钟，取上清待测。
3.同时测定上清的蛋白含量。
三、钙加样：
选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的96孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、样品孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免气泡的产生。如果样品中的钙离子含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行孔。

加入物(μL)	空白管	标准管	样品管
试剂D：双蒸水	2.5	-	-
试剂A：钙标准液(5mmol/L)	-	2.5	-
待测样品	-	-	2.5
钙显色工作液	200	200	200

四、钙测定
混匀，室温静置10min，以空白孔调零，酶标仪测定标准孔、样品孔610nm处吸光度(即为A标准、A样品)。
五、计算
样本中钙(mmol/g)=(A样品/A标准)×5÷蛋白浓度(g/L)
式中：A样品为样品孔的吸光度；
A标准为标准孔的吸光度；
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