植物超纯囊泡快速提取试剂盒

产品货号：

HR8652

中文名称：

植物超纯囊泡快速提取试剂盒

英文名称：

Plant Ultra-Pure Vesicle Fast Isolation Kit

产品规格：

20T|50T

发货周期：

1～3天

产品价格：

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简要说明：

本试剂盒适用于从各种植物叶片等样品中提取高纯度总囊泡。不需要超速离心，仅需通过简单的常规离心即可从样本中快速获取大量结构完整的囊泡，具有快速简单，提取效率高的特点，可节省更多的实验时间和样本。提取的囊泡可根据实验目的用于后续的多种实验，应用范围广泛。本试剂盒可以提取所有直径为10～3000nm的囊泡结构。

产品特点：

使用方便，无需超速离心，省时省力。
纯度高，富集量大，应用范围广。
获取的囊泡结构和功能完整。
稳定性好，便于运输，便于保存。

注意事项：

不同样本的囊泡数量差异极大，请根据实际情况选择样品的量，根据下游应用和参考文献确定。条件允许的情况下采用尽可能多的样本。
已经分离好的囊泡样本如果需要进行电镜观察，只能冰上或4℃保存，存放时间不超过两天，注意不可冷冻保存，否则可能会影响电镜观察效果。

使用方法：

清洗囊泡纯化离心管C（大）：
- 用缓冲液或纯水进行预清洗。
- 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用前移除并稍微离心甩干。
样品处理：
- 收集500mg～1g新鲜的待提取植物样品，根据不同样品进行剥皮、彻底清洗等处理，置2～8℃保存。
- 在样品中加入1～2mL试剂A，然后用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
- 将匀浆液1000×g离心15分钟。弃沉淀，收集上清。
- 小心将上清移入另一干净离心管中。
- 将样品在4℃条件下，3000×g离心30分钟。弃沉淀，收集上清。
- 小心将上清移入另一干净离心管中。
- 将样品在4℃条件下，12000×g离心60分钟。弃沉淀，收集上清。
- 小心将上清移入另一干净离心管中。即得到待提取植物匀浆液（0）。
囊泡粗提：
- 将待提取植物匀浆液（0）上清吸入离心管D中，套上液体收集管，在4℃，10000×g条件下离心5～10分钟。
- 将液体收集管中的液体吸入另一干净离心管。在4℃，16000×g条件下离心20分钟。弃沉淀，收集上清。即为1～2mL囊泡粗提液（I）。然后进行下列囊泡提取纯化步骤操作。
囊泡提取纯化：
- 将囊泡纯化离心管C（大）内管插入所提供的一个配套离心管中。
- 向内管中加入2mL的囊泡粗提液（I）样本，并盖上盖子。
- 将盖好盖子的囊泡纯化离心管放入离心转子中，用一个类似的离心管平衡。
- 以4000～10000×g离心约10～30分钟。离心至大约剩余100μL～200μL液体。
- 在100～200μL残余液体中加入1mL囊泡提取液B。
- 以4000～10000×g离心约10～30分钟。离心至大约剩余100μL～200μL液体。
- 离心结束后将整个离心管从离心机中取出，取出内管。
- 为了回收纯化后的囊泡，用200μL移液器插入纯化管的底部，吸出纯化后的100～200μL纯化囊泡悬液。
- 即得到囊泡样品纯品。
- 用纯水或PBS缓冲液洗涤内管和收集管，继续纯化下一个样品。
囊泡纯化离心管C（大）清洗和保存：
- 使用后用水冲洗干净；
- 内管加入超纯水4mL，4000×g离心5分钟；
- 吸净内管中的水，加入4mL 0.1M NaOH，4000×g离心20分钟；
- 用0.1M NaOH浸泡24小时；
- 用水冲洗干净；
- 用无菌水浸泡2～8℃保存。
- 外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。

常见问题：

准备做植物囊泡研究，初始样品量需要准备多少？
不同样本囊泡含量差异较大，根据文献选择起始样本量。有条件的情况下尽可能使用多一点样本量。
如何鉴定提取的囊泡？
通常使用透射电镜检测（形态）、粒径检测（大小）、囊泡标志蛋白Western blot检测等方法鉴定提取的囊泡。

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