产品货号:
KD0376
中文名称:
BY4742感受态细胞
英文名称:
BY4742 Competent Cell
产品规格:
10×100μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
基因型: MAT alpha,his3Δ1,leu2Δ0,lys2Δ0,ura3Δ0。
组分 | 规格 | 保存 |
BY4742感受态细胞 | 10×100μL | -80℃,6个月 |
Carrier DNA(10μg/μL) | 100μL | -20℃,一年 |
PEG/LiAc | 5mL | 4℃,一年 |
保存:-80℃,有效期6个月。
- 感受态细胞最好在冰上融化。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
- 一般酿酒酵母菌株对高温敏感,最适生长温度为27~30℃;高于31℃,生长速度和转化效率呈指数下降。
- 菌落变粉不是污染,是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后,平板上的Adenine被酵母消耗完毕,酵母试图通过自身代谢途径合成Adenine以供利用,然而,有些菌株的ADE2基因被破坏,Adenine合成途径受阻;又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常,所以造成中间产物P-ribosylamino imidazole (AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
- 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢,培养基中缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板29℃,48h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板29℃,48-60h培养可见直径1mm克隆。
- 取100μL冰上融化的感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2~5μg,Carrier DNA(95~100℃,5min,快速冰浴,重复一次)10μL,PEG/LiAc 500μL并吸打几次混匀,30℃水浴30min (15min时翻转6~8次混匀)。
- 将离心管放42℃水浴15min (7.5min时翻转6~8次混匀)。
- 5000rpm离心40 s弃上清,ddH2O 400μL重悬,离心30 s弃上清。
- ddH2O 50~100μL重悬,涂板,29℃培养48-96h。
- 筛选培养基可选本公司SD系列产品。
相关搜索:BY4742感受态细胞,BY4742 Competent Cell