产品货号：
KD0373
中文名称：
W303a(W303-1A)感受态细胞
英文名称：
W303a(W303-1A)Chemically Competent Cell
产品规格：
10×100μL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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基因型：MATa ade 2-1 can1-100 his3-11 leu2-3 leu2-112 trp1-1 ura3-1
| 组分 | 规格 | 保存 |
| W303-1A Competent Cell | 10×100μL | -80℃ |
| Carrier DNA (10μg/μL) | 100μL | -20℃ |
| PEG/LiAC | 5mL | 4℃ |
保存：-80℃，有效期6个月。
- 感受态细胞最好在冰上融化。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
- 酿酒酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27～30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
- 菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的Adenine被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破坏，Adenine合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
- 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。
- 取感受态细胞100μL于冰上融化的，依次加入预冷的目的质粒2～5μg，Carrier DNA (95～100℃，5min，快速冰浴，重复一次) 10μL，PEG/LiAc 0.5mL并吸打几次混匀，30℃水浴30min (15min时翻转6～8次混匀)。
- 将管放42℃水浴15min (7.5min时翻转6～8次混匀)。
- 10000rpm离心30s弃上清，ddH2O 400μL重悬，离心30s弃上清。
- ddH2O 50μL重悬，涂板，29℃培养48-96h。
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