产品货号:
KD2729
中文名称:
葡聚糖凝胶G-100 ,BR
英文名称:
Sephadex G-100
产品规格:
25g|100g|500g
发货周期:
1~3天
产品价格:
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1化学和物理性质
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其非特异性吸附最小化,并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。
2产品说明
3使用方法
Sephadex系列产品以干粉形式存在,使用前必须溶胀,在膨胀期间应避免过度搅拌,因为它可能破坏填料,不要使用磁力搅拌器。
3.1填料的准备
(1)将填料在过量去离子水或缓冲液中,室温条件下膨胀24小时,或用热水膨胀1小时。洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中,如果上层有漂浮物,请去除。
(2)将溶胀好的填料,所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度,对所有的缓冲液进行脱气处理。
3.2装柱
(1)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。
(2)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。
(3)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(4)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填料最大耐压)。
3.3平衡
上样前平衡层析柱至少5~10个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的pH值和电导值等于上柱的Buffer的pH值和电导值)。
3.4上样
样品一定要离心或过滤后(0.45μm滤膜)上样。
凝胶过滤的上样量一般为不大于5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1~2%的柱床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱子越高,分离效果相应越好,但是,柱高过高的凝胶柱会引起较大的反压,也应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可。
3.5洗脱方法
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱。
3.6在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是用0.1M氢氧化钠洗2个柱体积,再以至少10个柱体积平衡缓冲液再生。
4保存
未处理的填料,室温密闭保存。使用完的填料,用纯水将盐分彻底冲洗,最后保存在20%乙醇中,4℃保存。
5注意事项:
(1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用0.45μm的过滤器过滤。
(2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于0.1摩尔。碱会使流速变慢。
(3)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。
6不同规格特性
细颗粒:流速慢,分离效果最优。粗颗粒:流速快,分离效果偏差。
中颗粒:流速适中,分离效果适中,一般客户最常选用此型号。
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