产品货号:
YT274
中文名称:
β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒
英文名称:
β-galactosidase Assay Kit
产品规格:
200T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本产品是一种用于β-半乳糖苷酶报告基因检测的试剂盒。β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,经常与荧光素酶报告基因一起转染细胞,被用作荧光素酶报告基因检测的内参照,从而消除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。本试剂盒中所提供的裂解液适合于动物细胞的裂解,通常不适合于细菌、真菌和植物细胞的裂解。
本试剂盒是以无色的ONPG为底物,在β-半乳糖苷酶的催化下生成黄色的onitrophenol,然后通过酶标仪或分光光度计在420nm波长附近测定吸光度,从而实现对β-半乳糖苷酶活性的测定。
保存:报告基因细胞裂解液4℃保存3个月有效,-20℃保存至少一年有效。β-半乳糖苷酶检测试剂-20℃避光保存至少6个月有效,-80℃避光保存至少一年有效。β-半乳糖苷酶反应终止液可以室温保存,也可以4℃或-20℃保存。
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本试剂盒是以无色的ONPG为底物,在β-半乳糖苷酶的催化下生成黄色的onitrophenol,然后通过酶标仪或分光光度计在420nm波长附近测定吸光度,从而实现对β-半乳糖苷酶活性的测定。
组分 | 规格 |
报告基因细胞裂解液 | 100mL |
β-半乳糖苷酶检测试剂 | 10mL |
β-半乳糖苷酶反应终止液 | 35mL |
保存:报告基因细胞裂解液4℃保存3个月有效,-20℃保存至少一年有效。β-半乳糖苷酶检测试剂-20℃避光保存至少6个月有效,-80℃避光保存至少一年有效。β-半乳糖苷酶反应终止液可以室温保存,也可以4℃或-20℃保存。
- 最佳测定波长为420nm。在410~430nm范围内测定,具有相近的灵敏度。
- 本检测试剂盒和Promega荧光素酶报告基因的裂解液兼容。用Promega荧光素酶报告基因裂解液裂解的样品可以用本试剂盒测定。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 裂解细胞:按如下方式加入报告基因细胞裂解液,充分裂解细胞。细胞裂解后可以立即测定β-半乳糖苷酶活性,也可以先冻存,待以后再测定。冻存的样品需融解,并达到室温后才可以开始测定。建议使用12、24或48孔板进行报告基因检测。
器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板 细胞裂解液(μL/孔) 100 150 200 300 500 - 融解β-半乳糖苷酶检测试剂,并达到室温。充分融解β-半乳糖苷酶反应终止液,如有难溶结晶,请在37℃水浴溶解。
- 在96孔板中,分别加入5~50μL样品,然后加入报告基因裂解液至最后体积为50μL。由于不同的细胞体系,不同的转染方法的转染效率相差很大。在第一次测定时推荐取两个样品作预实验。在96孔板中,分别加入0μL,5μL,10μL,25μL,50μL样品,然后加入报告基因裂解液至最后体积为50μL。
- 在每个孔中加入β-半乳糖苷酶检测试剂50μL,混合后,盖上96孔板的盖子。可以用parafilm或保鲜膜封住96孔板防止蒸发。在37℃放置30分钟或直至样品孔内出现浅黄色。通常大约3小时后,吸光度达到平台,孵育更长时间吸光度不会明显升高。
- 加入150μL β-半乳糖苷酶反应终止液终止反应,混匀,尽量避免气泡。
- 按仪器操作说明书开启酶标仪或分光光度计,将测定波长设定为420nm,测定吸光度。
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