产品货号:
ME0023
中文名称:
细胞microRNA提取试剂盒
英文名称:
DIOG Cell miRNA extraction kit
产品规格:
30T|60T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本产品是高效提取细胞miRNA的专门试剂盒。采用独特的消化配方,先去除较大分子的DNA和rRNA,再使用miRNA富集技术,使细胞miRNA聚集起来,使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化,与部分同类试剂盒相比,显著提升了miRNA的提取效率。DIOG细胞miRNA提取试剂盒各组分经反复优化,操作也非常简便,只需30多分钟即可获得理想的提取结果。
- 采用独特的消化技术,去除较大分子的DNA和rRNA,使miRNA更容易分离提取;
- 采用miRNA富集技术,使细胞miRNA聚集起来,使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化,大幅提升miRNA的提取效率;
- 操作简便,只需30多分钟即可获得理想的miRNA提取结果。
组分 | 30T | 60T |
吸附柱和收集管 | 30套 | 60套 |
DIOG裂解液 | 4.5mL | 9.0mL |
DIOG消化液 | 0.65mL | 1.3mL |
miRNA释放剂 | 7mL | 14mL |
miRNA富集剂 | 160μL | 320μL |
洗涤液 | 3mL | 6mL |
洗脱液 | 1.0mL | 2.0mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:室温,其中DIOG消化液置于-20℃保存,有效期1年。
- 请准备:无水乙醇、PH7.5 PBS溶液、1.5mL RNA-Free离心管。
- 取出洗涤液,按85%比例加入无水乙醇,1.5mL加入8.5mL无水乙醇,充分混匀。
- 细胞处理:取培养细胞悬液,2000rpm离心5分钟,去培养上清,加50μL PH7.5 PBS,充分混匀。
- 加入150μL DIOG裂解液,20μL DIOG消化液,65度温育10分钟。
- 加入0.22mL miRNA释放剂,充分振荡混匀,室温放置2分钟;
- 13000rpm离心5分钟,将400μL上清液转移到1支新的1.5mL RNA-Free离心管;
- 加入5μL miRNA富集剂,再加入300μL无水乙醇,充分混匀,静置2分钟;
- 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,13000rpm离心1分钟,弃收集管内废液。
- 将吸附柱放回收集管内,加600μL洗涤液至吸附柱内,静置2分钟,13000rpm离心1分钟,弃收集管内废液。
- 按每份样本30μL取洗脱液(如10份提取样本,即取300μL洗脱液),放置于灭菌RNA-Free离心管,65℃预热。
- 将吸附柱放回收集管内,13000rpm离心2分钟,离去残留的乙醇。
- 取出吸附柱,放入新的1.5mL RNA-Free离心管,开盖放置2分钟,挥发乙醇。
- 加入30μL预热的洗脱液,静置2分钟,12000rpm离心1分钟,收集miRNA溶液。
- 裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。
- 由于RNA容易降解,提取实验所用器具应除去RNA酶,实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩,提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子(一般50μL RNA溶液加入2μL。)
- 洗涤液加入乙醇后要充分混匀,最好现用现配,每次根据所要提取的样本量计算后适量配制。
- 所用细胞量建议不高于107,洗涤液在使用前请加入无水乙醇后充分混匀。
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