产品目录

本试剂盒采用独特的miRNA富集技术，使血浆miRNA聚集起来，使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化，与部分同类试剂盒相比，显著提升了miRNA的提取效率。DIOG血浆miRNA提取试剂盒各组分经反复优化，操作也非常简便，只需30多分钟即可获得理想的提取结果。

• 操作简便快速，只需30多分钟即可获得理想的miRNA；
  
• 采用miRNA富集技术，使血清血浆miRNA聚集起来，使之更容易被核酸纯化膜吸附纯化，大幅提升miRNA的提取效率，较国内部分同类产品CT值小1～2个；
  
• 样本范围广，可广泛应用于血清、血浆、胸腹水等液体样本中miRNA的提取。

• 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。
  
• 血清血浆中miRNA含量较低，难以用NanoDrop测量其浓度，建议直接进行RT-PCR或RT-qPCR分析。
  
• miRNA释放剂、洗涤液含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。
  
• 提取的miRNA如暂不使用，应-70℃保存，可适当加入RNA保护因子（一般40μL RNA溶液加入2μL）。

• 请自行准备：无水乙醇、1.5mL RNase-free灭菌离心管。
  
• 取出洗涤液，按以下操作：
  
  • 洗涤液A：按终浓度30%的比例加入无水乙醇，如7mL加入3mL无水乙醇；14mL加入6mL无水乙醇，充分混匀。
    
  • 洗涤液B：按终浓度85%的比例加入无水乙醇，如1.5mL加入8.5mL无水乙醇；3mL加入17mL无水乙醇，充分混匀。
    
  • 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
• 取无RNA酶的1.5mL离心管，加入200μL样本，200μL miRNA释放剂及20μL消化液，充分混匀，65℃水浴10分钟。
  
• 加入5μL miRNA富集剂，0.85mL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
  
• 将吸附柱放入收集管内，将650μL上述溶液转入吸附柱内，12000rpm离心1分钟，弃收集管内废液；将剩余溶液转移至吸附柱内，12000rpm离心1分钟，弃收集管内废液。
  
• 将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液A至吸附柱内，静置2分钟，12000rpm离心1分钟，弃收集管内废液。
  
• 将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液B至吸附柱内，静置2分钟，12000rpm离心1分钟，弃收集管内废液。
  
• 将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液B至吸附柱内，12000rpm离心1分钟，弃收集管内废液。
  
• 按每份样本30μL取洗脱液（如10份提取样本，即取300μL洗脱液），放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
  
• 将吸附柱放回收集管内，12000rpm离心2分钟，离去残留的洗涤液。
  
• 取出吸附柱，放入新的1.5mL RNase-free灭菌离心管内，开盖，室温放置2分钟。
  
• 在吸附柱中心加入30μL预热洗脱液，静置2分钟，12000rpm离心1分钟，收集miRNA溶液。提取的miRNA即可用于下一步实验或-70℃保存。