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本制品是本公司根据很多软体动物多糖多酚的特点而专门开发的RNA纯化试剂盒，其提取纯化效果在多种各类软体动物中得到验证。

• 操作更加简单快速，处理一个样品只需要约10分钟。
  
• 所得到的RNA OD260/280平均在2.0左右。
  
• 含有专门去除多糖和多酚的成分，污染残留少。
  
• 得到的RNA可直接用于RT-PCR、RT-LAMP、Northern杂交、cDNA合成等后续实验。
  
• 性价比高于进口的柱式软体动物RNA提取产品。
  
• 本制品不适合纯化软体动物小RNA。

• 每次微量提取需要100～200mg软体动物组织。
  
• 样品破碎：
  
  • 匀浆法：先将新鲜软体动物组织剪切成小块，放入10～15mL塑料离心管中，加入1mL软体动物RNA提取溶液A，然后用Polytron剪切式匀浆器匀浆5～20秒，然后见匀浆液转移到1.5mL塑料离心管中。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。
    
  • 液氮研磨法（适用于复杂，易降解样品）：取适量新鲜软体动物组织放入含液氮的研钵中，迅速将组织研磨成粉末后，将粉末转移到1.5mL的塑料离心管中，加入1mL软体动物RNA提取溶液A，立即剧烈振荡20秒，充分混匀。
• 在装有匀浆液或研磨物的1.5mL离心管中加入0.3mL的软体动物RNA提取溶液B和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
  
• 室温13000×g离心5分钟，两相间将有约5～10mm厚的细胞破碎物。
  
• 将上清液（约0.6mL）转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。
  
• 加入等体积的软体动物RNA提取溶液C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生（对某些软体动物，属于正常现象），千万不要去掉沉淀。
  
• 将一半的溶液（如果有沉淀，则先混匀后一起取用）转移到离心吸附柱中，13000×g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 将剩下的一半溶液（如果有沉淀，则先混匀后一起取用）转移到同一离心吸附柱中，13000×g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 加0.7mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的洗柱液会影响RNA的使用。
  
• 将离心吸附柱转移到一个自备的干净的RNase-free收集管中，加入50μL RNA洗脱液，室温放置1分钟。
  
• 13000×g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

• RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子。如果电泳发现DNA污染严重（跟样品相关）建议使用含有RNase-free DNase处理步骤的软体动物RNA纯化试剂盒（过柱法，含DNase），也可以另购RNase-free DNase降解DNA。
  
• RNA产量产率测定：将1μL RNA跟1μL TE缓冲液中（pH7.5～8.2之间）混合，然后在NanoDrop上测其在OD260的光吸收和浓度，进而计算出RNA的产量（浓度×体积)和产率(RNA产量/软体动物组织用量)。
  
• RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8～2.1之间，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。