产品货号:
KL221040
中文名称:
小RNA胶回收试剂盒(沉淀法)
英文名称:
miRNA Gel Recovery Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离100nt以下的小片段RNA,尤其是20nt左右的microRNA (miRNA)的主要方法,但是目前市场上用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收miRNA片段的产品还很少,为此本公司开发了本制品。
- 可以回收15~3000nt范围内的各种长度的RNA,包括100nt以下miRNA片段。
- miRNA回收率达到90%左右,3000nt的RNA的回收率达到30%左右。
- 一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
- 扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
- 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
- 也可用于从琼脂糖凝胶中回收miRNA。
- 本制品足够50次小RNA的微量回收。
- 本制品只能用于科研。
组分 | 规格 |
小RNA胶回收溶液A | 25mL |
小RNA胶回收溶液B | 50mL |
小RNA胶回收溶液C | 50mL |
保存:室温,有效期一年。
固相RNase清除剂、PAGE凝胶电泳试剂、EB或其他RNA染料、刀片、RNase-free的1.5mL塑料离心管、移液枪、RNase-free水。
- 用自备的固相RNase清除剂或类似的产品对实验所需要的物品进行去RNase处理(表面RNase清除剂可以从本公司另购)。
- 对RNA样品进行PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳。
- 电泳结束后用EB或其他RNA染料对PAGE胶进行染色并确定目标RNA条带所在的位置。
- 用干净的刀片切下目的RNA条带,置于RNase-free的1.5mL塑料离心管中。
- 用移液枪头捣烂凝胶块,使其断裂成芝麻大小或更细,也可以包在锡箔纸活塑料膜中放-80℃冻成硬块,然后在包着的状态下,用研磨杵研磨成粉,越细越好。
- 在捣碎的PAGE胶中加入0.5mL小RNA胶回收溶液A。
- 在摇床上室温摇晃4小时(小于500nt的RNA片段)或24小时(对1000nt以上的RNA片段)。
- 13000g室温离心10分钟,转移上清到一只新的RNase-free 1.5mL塑料离心管中。
- 加入2倍体积(1mL)的小RNA胶回收溶液B。
- 小RNA胶回收溶液B有沉淀,属于正常现象,用前必须摇晃均匀取用。
- 上下颠倒数次混匀后,13000g室温离心30分钟。
- 小心用移液枪弃上清,RNA(和小RNA胶回收溶液B中的助沉剂)在管底离心面会形成细小白色沉淀,注意不要吸弃此沉淀。
- 管中再加入1mL小RNA胶回收溶液C。
- 颠倒数次混匀后13000g室温离心5分钟。
- 小心弃上清,注意不要吸弃管底的细小沉淀。
- 再短暂离心半分钟,吸尽残留的约50μL的液体。
- 将RNA沉淀溶于适量的(如30~50μL)自备的RNase-free水中或直接溶解在后续反应的反应液中,立即使用或放-70℃保存。
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