产品货号:
KD2156
中文名称:
真菌RNA提取试剂盒
英文名称:
Fungal RNA Extraction Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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保存:2~8℃
Biorab真菌RNA快速提取试剂盒适用于各种形态和各个种属的真菌及革兰氏阳性细菌,包括Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomycespombe、Pichiapastoris、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus等。
自备试剂:
氯仿
(一)菌体裂解:
1.将50mg的干菌丝(或100mg的鲜菌丝、或适当数量的真菌菌落)转移到1.5mL离心管中。对于液体真菌培养物,在1.5mL离心管中多次离心收集1~10mL的菌体沉淀。
2.在菌体沉淀中加入0.4mL裂解液I震荡混匀。
注:如果裂解液I存放时产生沉淀,请置于65℃融化后使用。
3.加入0.4mL裂解液II,剧烈震荡30 s后65℃水浴5min。
4.12,000-15000rpm离心3min,转移上清到1.5mL离心管中。
5.在上清中加入0.1mL的裂解液II和0.1mL氯仿(自备)震荡30 s混匀。
6.12,000-15000rpm离心3min,转移上清到5mL离心管中。
(二)RNA收集:
1.在步骤(一)所得的上清中加入3倍体积(约1.5mL)的结合液III和1倍体积(约0.5mL)的结合液IV,颠倒数次混匀后,分多次上RNA吸附柱,每次上柱后均先室温放置2min,然后12000rpm离心1min,倒掉穿透液。
2.在吸附柱中加入500μL洗涤液,12000rpm离心1min,弃穿透液。
3.再将吸附柱12000rpm离心30 s以甩干乙醇。
4.将吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附柱中央加入50μL洗脱液,室温静置2min。
5.12000rpm离心2min。离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
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