产品货号:
BTN90903
中文名称:
DNase溶液(无RNase活性)
英文名称:
RNase-Free DNase Solution
产品规格:
1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase,专门用于降解RNA样品中的DNA污染。
产品特点:
产品组成:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
相关搜索:DNase溶液(无RNase活性),RNase-Free DNase Solution
产品特点:
- 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
- 同时降解单链DNA和双链DNA。
- 不含RNase,可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
- 反应条件经过优化,可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA,也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
- 可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移(Nick Translation)和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。
产品组成:
成分 | 规格 |
RNase-free DNase(1U/μL) | 500μL×2 |
10×DNase Buffer | 1mL |
50mM EDTA溶液 | 1mL |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
- 在一无RNA酶的离心管中配制50μL的反应液:
成分 用量 RNA样品 1μg 10×DNase Buffer 1μL RNase-free DNase(1U/μL) 1μL 自备的RNase inhibitor(40U/μL) 0.5~1μL(可不加) 补超纯水到 10μL - 混匀,短暂离心,37℃放置30分钟;
- 加入2μL 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/氯仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp
试剂盒进行柱式纯化,回收RNA。 - 电泳检测是否去除了基因组DNA,然后进行后续实验。
二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
- 在柱式法提取过程中,完成洗涤步骤。
- 配制50μL DNase工作液。
成分 用量 10×DNase Buffer 5μL RNase-free DNase(1U/μL) 10μL 自备的RNase inhibitor(40U/μL) 0.5~1μL(也可不加) 补超纯水到 50μL - 加在离心吸附柱中间,室温放置5~30分钟。
- 加入0.5mL自备洗柱液洗涤两次。
- 用RNA洗脱液洗脱即得无DNA的RNA样品。
三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
- 按2U RNase-free DNase/μg DNA模板的比例在RNA体外转录反应中加入RNase-free DNase。
注意:酶的最佳用量也许需要优化。 - 37℃放置15分钟。
- 加入2μL 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟;此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/氯仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp试剂盒(需另购)进行柱式纯化,回收RNA。
四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
- 按下表设置切口平移标记反应:
成分 用量 10×DNA聚合酶I缓冲液 2.5μL 3 dNTP mixture,1mM each 1.25μL 标记核苷酸:非标记核苷酸混合(3:7,1mM) 1μL RNase-free DNase(0.002U/μL,见注) 1μL DNA聚合酶I(10U/μL) 0.5~1.5μL 模板DNA 0.25μg 加水到 25μL
注:稀释RNase-free DNase的缓冲液为1×DNA聚合酶I缓冲液:50mM - 15℃放置15~60分钟。
- 加入10μL 50mM EDTA溶液。
- 65℃放置15分钟灭活酶。
- 所得探针可以纯化后使用,也可以直接使用。
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